Diferència clau: HPLC vs HPTLC
La diferència clau entre HPLC i HPTLC és que l'HPLC permet la separació quantitativa de components en una mostra, mentre que l'HPTLC no permet la separació quantitativa de components en una mostra.
La cromatografia és un mètode de separació física que s'utilitza per separar i identificar els components d'una mescla. Tant HPLC com HPTLC són tècniques cromatogràfiques. HPLC és la cromatografia líquida d' alt rendiment. HPTLC és una cromatografia en capa fina d' alt rendiment.
Què és l'HPLC?
HPLC és la cromatografia líquida d' alt rendiment. És una tècnica analítica utilitzada per separar, identificar i quantificar components d'una mescla. En aquesta tècnica, la mostra es dissol en un dissolvent adequat. A continuació, el dissolvent amb la mostra es fa passar per una bomba amb una pressió determinada. La bomba està plena de material adsorbent sòlid. Aleshores, alguns components s'uneixen fortament al material absorbent, mentre que altres components s'uneixen sense problemes. Això fa que els components tinguin diferents cabals a través de la bomba. Per tant, els components es poden separar fàcilment.
Figura 01: Un sistema HPLC
El material adsorbent que omple la bomba es coneix com a fase estacionària. El dissolvent amb la mostra dissolta es coneix com a fase mòbil. La bomba utilitzada en aquesta tècnica s'anomena columna. La columna s'omple amb un material adsorbent, més habitualment, partícules de sílice. La mida d'aquestes partícules pot oscil·lar entre 2 i 50 μm. El procés de separació es veu afectat per la composició de la fase mòbil i la temperatura del sistema. Les interaccions entre la fase estacionària i el component de la mostra poden ser interaccions hidrofòbiques, interaccions dipol-dipol, enllaços iònics, etc.
La pressió de funcionament de la HPLC és considerablement superior a la de la cromatografia líquida tradicional. Es troba al voltant dels 50-350 bar. La diferència entre la cromatografia líquida i l'HPLC és que en la cromatografia líquida, la mostra cau a través de la columna per gravetat, mentre que, en l'HPLC, la mostra es pressuritza a través de la columna. La mida de la columna i les partícules absorbents també són molt petites en comparació amb la cromatografia líquida tradicional. Tanmateix, la resolució que ofereix la tècnica HPLC és superior.
Què és HPTLC?
HPTLC és una cromatografia en capa fina d' alt rendiment. És la forma avançada i automatitzada del TLC tradicional. Aquesta tècnica proporciona una resolució eficient en un període de temps curt. En aquest mètode d'anàlisi, la mostra i una referència es poden analitzar alhora, la qual cosa permet comparar la mostra amb la referència. Dóna una precisió analítica millorada que altres tècniques cromatogràfiques. El temps necessari per a l'anàlisi és menor. La tècnica és una tècnica de baix cost.
Figura 02: una anàlisi de colorants alimentaris mitjançant HPTLC
El mètode HPTLC és un procés senzill i també s'elimina l'etapa de preparació de la mostra (en el TLC tradicional, l'etapa de preparació de la mostra s'inclou abans de la separació. Aquest pas implica neteja i enriquiment). El dissolvent es pot utilitzar directament sense cap tractament previ encara que altres tècniques cromatogràfiques requereixen tractaments previs com ara desgasificació, filtració, etc.
El material adsorbent utilitzat en HPTLC és sílice amb mides de partícules molt petites. En TLC tradicional, la mida de partícules de sílice és de 5-20 μm mentre que, en HPTLC, és de 4-8 μm. La mostra s'aplica a la placa HPTLC mitjançant un aplicador. Dóna una aplicació uniforme i segura. A continuació, les plaques es col·loquen en una cambra que té la fase mòbil. La cambra ha d'estar saturada amb el vapor de la fase mòbil. Després del procés HPTLC, es poden detectar els punts que s'han mogut. En detectar les taques a la placa, la tècnica HPTLC utilitza una regió UV adequada o una cambra de iode.
Quina diferència hi ha entre HPLC i HPTLC?
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC és cromatografia líquida d' alt rendiment. | HPTLC és una cromatografia en capa fina d' alt rendiment. |
| Tècnica | |
| En HPLC, la fase mòbil amb el dissolvent es fa passar per una columna plena amb la fase estacionària. | A HPTLC, la mostra es localitza en una placa TLC i es col·loca dins d'una cambra que conté la fase mòbil; aleshores es permet que la mostra migri cap amunt de la placa juntament amb la fase mòbil. |
| Mesura | |
| A l'HPLC, les diferències entre els cabals dels components a través de la columna s'utilitzen per separar els components de la mostra. | A HPTLC, les diferències entre les distàncies recorregudes per cada component de la mostra s'utilitzen per separar els components de la mostra. |
| Separació quantitativa | |
| HPLC permet la separació quantitativa dels components d'una mostra. | HPTLC no permet la separació quantitativa dels components d'una mostra. |
Resum: HPLC vs HPTLC
HPLC i HPTLC són dues tècniques cromatogràfiques. La diferència clau entre HPLC i HPTLC és que l'HPLC permet la separació quantitativa de components en una mostra, mentre que l'HPTLC no permet la separació quantitativa de components en una mostra.
