La diferència clau entre l'HPLC de fase inversa i la fase normal és que l'HPLC de fase inversa utilitza una fase estacionària no polar i una fase mòbil polar, mentre que l'HPLC de fase normal utilitza una fase estacionària polar i una fase mòbil menys polar.
La HPLC en fase normal és la tècnica més antiga de HPLC que Tswett va utilitzar en les seves separacions d'extractes vegetals; va utilitzar guix en una columna de vidre. Aquest va ser el mode clàssic de cromatografia que va portar a anomenar-la com la tècnica "normal". L'HPLC de fase inversa, en canvi, és el contrari de la tècnica normal, que els científics han desenvolupat darrerament.
Què és la HPLC de fase inversa?
HPLC de fase inversa és una tècnica cromatogràfica en la qual fem servir una fase estacionària hidròfoba. Entre tots els mètodes d'HPLC, utilitzem aquest mètode aproximadament un 70% a causa de la seva àmplia aplicabilitat i reproductibilitat. La fase estacionària és no polar i la fase mòbil és polar.
La majoria de vegades, els científics utilitzen una barreja aquosa d'aigua amb un dissolvent orgànic polar miscible, com l'acetonitril o el metanol com a fase mòbil. Per tant, els analits interaccionen amb la fase estacionària no polar.
Què és la HPLC de fase normal?
HPLC en fase normal és una tècnica cromatogràfica en la qual fem servir una fase estacionària hidròfila. És el mètode tradicional de HPLC, encara que no l'utilitzem tant. La fase estacionària és polar i la fase mòbil no polar. Més important encara, la fase mòbil d'aquesta tècnica és 100% orgànica. Vol dir que no s'utilitza aigua per a això.
Figura 01: un perfil de mostra per a cromatogrames HPLC en fase normal i en fase inversa segons la polaritat dels components de l'analit.
Típicament, la fase estacionària conté sílice, ciano, diol, fases unides a amino, etc. Les fases mòbils inclouen dissolvents orgànics com l'hexà, l'acetat d'etil, etc. Aquesta tècnica es basa en la retenció de molècules de dissolvent o analit a la superfície. fase estacionària polar.
Quina diferència hi ha entre HPLC de fase inversa i fase normal?
HPLC de fase inversa és una tècnica cromatogràfica en la qual fem servir una fase estacionària hidròfoba. La fase estacionària d'aquesta tècnica és no polar mentre que la fase mòbil és polar. A més, els científics utilitzen una barreja aquosa d'aigua amb un dissolvent orgànic polar miscible, com l'acetonitril o el metanol com a fase mòbil en HPLC de fase inversa. En canvi, la HPLC en fase normal és una tècnica cromatogràfica en la qual utilitzem una fase estacionària hidròfila. La fase estacionària d'aquesta tècnica és polar mentre que la fase mòbil és no polar. A més d'això, els científics utilitzen dissolvents orgànics com l'hexà, l'acetat d'etil, etc. com a fase mòbil de l'HPLC en fase normal. La infografia següent presenta la diferència entre HPLC en fase inversa i fase normal en forma tabular.
Resum: HPLC de fase inversa versus fase normal
Les tècniques HPLC de fase inversa i fase normal són dues tècniques de cromatografia líquida. La diferència clau entre HPLC de fase inversa i fase normal és que la HPLC de fase inversa utilitza una fase estacionària no polar i una fase mòbil polar, mentre que la HPLC de fase normal utilitza una fase estacionària polar i una fase mòbil menys polar.
