Transformació vs transfecció
La transformació i la transfecció són dues tècniques senzilles que s'utilitzen per introduir un gen estrany a una cèl·lula hoste. Tanmateix, aquestes tècniques depenen del tipus de sistema host o vector.
Què és la transformació cel·lular?
La transformació és la tècnica emprada per introduir gens en cèl·lules de llevats i bacteris. Aquesta tècnica sol provocar canvis hereditaris en els gens i, per tant, l'expressió del gen és permanent. La transformació bacteriana va ser introduïda per primera vegada el 1928 per Frederick Griffith. Després, a principis de la dècada de 1970, aquesta tècnica es va utilitzar a E.coli. Durant el procés de transformació d'E. coli, les cèl·lules es remullen en una solució gelada de CaCl2 Aquest pas fa que les cèl·lules d'E.coli siguin competents. Després d'això, les cèl·lules competents es barregen amb l'ADN plasmidi i s'incuben en gel durant 20-30 min. A continuació, es fa un xoc tèrmic curt per tal de permetre la transferència d'ADN a la cèl·lula. Finalment, les cèl·lules es col·loquen en un brou nutritiu i s'incuben a 37 °C durant 60-90 min per tal d'establir els plasmidis. Un cop finalitzats aquests passos amb èxit, les cèl·lules transformades es poden col·locar en un medi adequat per a la propagació de cèl·lules. Com que la transformació es considera una tècnica ineficient, és possible que no s'utilitzi per a la preparació de bancs de clons.
Què és la transfecció cel·lular?
La transfecció és un mètode d'introducció d'un gen estrany, normalment, a les cèl·lules dels mamífers. Hi ha dos mètodes de transfecció; és a dir, transfecció transitòria i transfecció estable. En la transfecció transitòria, l'expressió gènica està disponible durant un temps limitat; així, l' alteració del gen provoca l'expressió temporal. Aquest mètode de transfecció és senzill i ràpid; per tant, es pot utilitzar habitualment. Un inconvenient de la transfecció transitòria és la dificultat d'aplicar sistemes de síntesi de proteïnes a gran escala.
Durant la transfecció estable, un gen objectiu s'integra al genoma de la cèl·lula hoste i, per tant, l'expressió gènica és permanent, a diferència de la transfecció transitòria.
Quina diferència hi ha entre la transformació i la transfecció?
• La transformació és la introducció d'un gen en una cèl·lula procariota (bacteriana i llevat), mentre que la transfecció s'anomena generalment la introducció d'un gen en una cèl·lula de mamífer.
• La transformació dóna lloc a una alteració hereditària dels gens, mentre que la transfecció pot provocar una expressió temporal o canvis permanents en els gens.
