Diferència clau: transfecció transitòria vs estable
La transfecció és un procés implicat en la transferència de gens de cèl·lules eucariotes mitjançant mètodes químics o físics. La transfecció es pot classificar en dos tipus principals anomenades transfecció transitòria i transfecció estable. Durant la transfecció transitòria, el gen d'interès no s'integra amb el genoma de l'hoste i s'expressa temporalment dins de l'hoste durant un curt termini, mentre que, en una transfecció estable, el gen d'interès s'integra amb el genoma de l'hoste i es manté durant un llarg termini en diverses generacions.. Aquesta és la diferència clau entre transfecció transitòria i estable. En ambdós casos, la transfecció té èxit i els gens s'expressen.
Què és la transfecció transitòria?
La transfecció és una eina important per inserir gens a les cèl·lules eucariotes. Entre els dos tipus de transfecció, la transfecció transitòria és una forma habitual de transferència de gens. Mitjançant un vector, els gens estrangers es transformen dins de les cèl·lules hoste. Un cop l'ADN estrany entra a la cèl·lula hoste, té dues opcions. Pot integrar-se amb el genoma de l'hoste i replicar-se, o romandre a l'interior sense integrar-se al genoma. La transfecció transitòria mostra l'expressió temporal dels gens inserits sense integrar-se al genoma hoste. Els gens expressen i produeixen la proteïna codificada fins que la cèl·lula es divideix. Tanmateix, a causa de la incapacitat d'integració, no es pot replicar i entrar en les generacions futures. Aquest tipus de transfecció té èxit durant un període de temps curt. Durant la divisió cel·lular o a causa d'alguns altres factors, l'ADN estrany està sotmès a degradació. La transfecció transitòria es mostra quan l'ADN estrany està en forma d'ADN molt enrotllat.
Figura 01: transfecció transitòria
Què és la transfecció estable?
La transfecció estable mostra una integració reeixida de gens estrangers al genoma hoste. Una vegada que l'ADN estrany entra a l'interior de la cèl·lula hoste, part de l'ADN estrany s'integra amb el genoma hoste i es converteix en part d'aquest. Per tant, l'ADN estranger també es replica i passa a les generacions futures quan es replica el genoma hoste. Aquest tipus de transfecció és complex i poc freqüent. Tanmateix, a causa de la transfecció estable al genoma, aquest tret es manté durant un període més llarg de diverses generacions.
La transfecció estable és un procés difícil i requereix un lliurament efectiu d'ADN i l'adquisició cel·lular de l'ADN estrany al seu genoma. Per tant, l'ADN lineal afavoreix la transfecció estable que l'ADN circular. Tanmateix, la taxa de transfecció estable és d'aproximadament una de cada 10 4 cèl·lules transformades. Es pot observar una transfecció estable mitjançant la cotransformació d'un marcador seleccionable i realitzant la selecció artificial en un medi.
Figura 02: Transfecció estable
Quina diferència hi ha entre la transfecció transitòria i la estable?
Transfecció transitòria vs estable |
|
| L'ADN estranger no s'integra en un genoma hoste. | L'ADN estranger s'integra amb el genoma de l'hoste i es converteix en part d'aquest. |
| Rèplica dins de l'amfitrió | |
| Els gens transfectats de manera transitòria no es repliquen a l'hoste. Per tant, els gens no es transmeten a les generacions següents. | Els gens es reprodueixen a l'amfitrió i es transmeten a les generacions futures. |
| Temps de durada de l'expressió gènica | |
| Els gens s'expressen durant un període de temps finit i després d'això, es destrueixen. | Els gens passen a formar part del genoma i s'expressen dins de la generació durant un llarg període de temps. |
| Utilitzar | |
| Això és útil per estudiar els efectes de l'expressió a curt termini de gens o productes genètics. | Això és útil per estudiar els efectes de les expressions gèniques a llarg termini. |
| Detecció de la transfecció | |
| Els gens s'expressen i es poden detectar fàcilment inserint un gen reporter. | La transfecció estable es pot detectar fàcilment inserint un marcador seleccionable i seleccionant mitjançant selecció artificial al suport. |
| Ocurrència i procés | |
| La transfecció transitòria és habitual i no és complexa de realitzar. | La transfecció estable és poc freqüent i és complexa de realitzar. |
| Naturalesa de l'ADN | |
| El DNA molt superenrotllat és adequat per a la transfecció transitòria. | L'ADN lineal és adequat per a una transfecció estable. |
| Aplicacions | |
| Això s'utilitza per a estudis de derrocament o silenciament de gens amb ARN inhibidors, producció de proteïnes a petita escala | Això s'utilitza per a la producció de proteïnes a gran escala, estudis de farmacologia a llarg termini, teràpia gènica, investigació sobre els mecanismes de regulació genètica a llarg termini |
Resum: transfecció transitòria vs estable
Les transfeccions transitòries i estables són dos tipus de transfeccions que es mostren durant la transferència del gen a cèl·lules eucariotes mitjançant sistemes no virals. L'ADN estranger transformat no s'integra amb el genoma hoste en transfecció transitòria mentre que s'integra amb el genoma hoste en transfecció estable. L'ADN circular en espiral es mostra transfecció transitòria, mentre que l'ADN lineal prefereix una transfecció estable. Aquesta és la diferència entre transfecció transitòria i estable. Tanmateix, la transfecció transitòria és més freqüent i fàcil en comparació amb la transfecció estable. Però la selecció d'un entre dos depèn de la finalitat de la transferència de gens i de la durada del projecte de recerca.
