La diferència clau entre l'assaig de proteïna Bradford i Lowry és que l'assaig de proteïna Bradford es basa en el canvi d'absorbància del colorant blau brillant Coomassie G-250, mentre que l'assaig de proteïna Lowry es basa en la reacció dels ions de coure (Cu+) produït per l'oxidació dels enllaços peptídics amb el reactiu Folin–Cioc alteu.
Un assaig és una tècnica analítica que ajuda a caracteritzar els components funcionals principals d'una mostra. Per tant, un assaig podria ser una prova qualitativa o quantitativa. Molts camps, com ara la medicina de laboratori, la farmacologia, la biologia ambiental, la biologia molecular, la bioquímica i la immunologia, utilitzen aquest tipus d'assajos de manera rutinària. L'assaig de proteïnes Bradford i Lowry són dos assajos bioquímics que determinen la concentració de proteïnes en una solució de mostra. Tots dos assaigs utilitzen tècniques colorimètriques per proporcionar resultats.
Què és l'assaig de proteïnes de Bradford?
L'assaig de proteïnes de Bradford és un procediment analític espectroscòpic ràpid per a l'anàlisi de proteïnes. Mostra una alta precisió quan es mesura la concentració de proteïnes en una solució. Marion Bradford va introduir aquest procediment l'any 1976. En aquest assaig, la reacció total es basa en la composició d'aminoàcids de les proteïnes mesurades. En altres termes, l'assaig de proteïnes Bradford és un assaig colorimètric. Utilitza el colorant blau brillant Coomassie. Per tant, aquest assaig colorimètric de proteïnes depèn del canvi d'absorbància del colorant. Coomassie brillant blau G-250 existeix en tres formats: catiònic (vermell), aniònic (blau) i neutre (verd). En condicions àcides, la forma vermella del colorant es converteix en blau. Confirma la unió de la proteïna. Si la proteïna no està present, la solució pot romandre de color marró.
Figura 01: assaig de proteïnes Bradford
L'assaig de proteïnes Bradford difereix d' altres assaigs de proteïnes ja que és menys susceptible a les interferències de diversos compostos químics presents a la solució de proteïnes. Aquests compostos inclouen sodi, potassi, glucosa i sacarosa, etc.
Què és l'assaig de proteïnes de Lowry?
L'assaig de proteïnes Lowry és un assaig bioquímic que s'utilitza per determinar el nivell total de proteïnes en una solució. Oliver H. Lowry és la persona que va desenvolupar aquest reactiu l'any 1940. El procediment representa la concentració total de proteïnes de la solució mitjançant un canvi de color que és proporcional a la concentració de proteïnes de la solució. Per tant, també és un assaig colorimètric de proteïnes.
La reacció entre els ions de coure (Cu+) produïts per l'oxidació dels enllaços peptídics i el reactiu Folin-Cioc alteu és la base d'aquest procediment. A més, aquest reactiu conté àcid fosfomolíbdic i àcid fosfor-tungstic. Tanmateix, el mecanisme de reacció de l'assaig de proteïnes de Lowry no s'entén bé. Però implica l'oxidació de residus de cisteïna, triptòfan i tirosina mitjançant la reducció del reactiu Folin-Cioc alteu.
Figura 02: assaig de proteïnes Lowry
Els residus de cisteïna contribueixen a l'absorbància observada en l'assaig de proteïnes de Lowry i la reacció dóna com a resultat una molècula blava brillant; blau de molibdè heteropoli. La reducció d'aquesta molècula es mesura per absorbància a 660 nm. Per tant, la concentració de residus de cisteïna i triptòfan que va reduir el reactiu Folin-Cioc alteu dedueix la concentració total de la proteïna a la solució.
Quines similituds hi ha entre l'assaig de proteïnes de Bradford i Lowry?
- Els assajos de proteïnes de Bradford i Lowry determinen la concentració de proteïnes en una solució.
- Ambdós mètodes són mètodes colorimètrics.
- A més, la sensibilitat dels dos mètodes és alta.
Quina diferència hi ha entre l'assaig de proteïnes Bradford i Lowry?
L'assaig de proteïnes de Bradford i Lowry són dos tipus d'assaigs que determinen la concentració de proteïnes en una solució. L'assaig de proteïnes Bradford es basa en el canvi d'absorbància del colorant blau brillant Coomassie G-250, mentre que l'assaig de proteïnes Lowry depèn de la reacció dels ions de coure produïts per l'oxidació dels enllaços peptídics, amb el reactiu Folin-Cioc alteu. Per tant, aquesta és la diferència clau entre l'assaig de proteïnes Bradford i Lowry. L'assaig de proteïnes Bradford triga 15 minuts a produir un resultat, mentre que l'assaig de proteïnes Lowery triga 40-60 minuts a produir un resultat. Per tant, aquesta és una altra diferència entre l'assaig de proteïnes de Bradford i Lowry. A més, l'assaig de proteïnes de Bradford depèn de la composició d'aminoàcids, mentre que l'assaig de proteïnes de Lowry depèn parcialment de la composició d'aminoàcids. Per tant, aquesta també és una diferència entre l'assaig de proteïnes de Bradford i Lowry.
La informació inforàfica a continuació proporciona més detalls sobre la diferència entre l'assaig de proteïnes de Bradford i Lowry.
Resum: assaig de proteïnes Bradford i Lowry
Un assaig és una tècnica analítica que s'utilitza per caracteritzar el component funcional principal d'una mostra. L'assaig de proteïnes Bradford i Lowry són dos tipus d'assaigs de proteïnes que funcionen amb tècniques colorimètriques. Tant els assaigs de proteïnes de Bradford com de Lowry determinen la concentració de proteïnes en una solució. Tanmateix, la diferència clau entre Bradford i Lowry Protein Assay rau en la tècnica colorimètrica que utilitzen. L'assaig de proteïnes Bradford utilitza el blau brillant G-250 de Coomassie mentre que l'assaig de proteïnes Lowry utilitza ions de coure (Cu+) i reactiu Folin-Cioc alteu. A més, el mètode Bradford dóna resultats ràpids que l'assaig de proteïnes Lowry. Tanmateix, tots dos mètodes són mètodes molt sensibles i estan subjectes a interferències de diverses substàncies.
