La diferència clau entre el radioimmunoassaig i l'assaig immunoradiomètric és que en el radioimmunoassaig, la mostra o el compost a mesurar es combina amb un antigen radioactiu abans de la combinació, mentre que en l'assaig immunoradiomètric, la mostra o el compost es combina immediatament amb el radiomarcat. anticossos.
Un immunoassaig és una prova bioquímica que detecta la presència o concentració de macromolècules en una solució mitjançant un anticòs o antigen. Els anticossos fluorescents i radioactius s'utilitzen per mesurar antígens en una mostra. Inicialment, els anticossos es van utilitzar en tècniques de precipitació com la immunoprecipitació, la immunodifusió i l'electroforesi immune per a l'anàlisi de proteïnes sèriques. Actualment, s'utilitzen tècniques altament sensibles, com ara radioimmunoassaig i assajos immunoradiomètrics, per mesurar fàrmacs, marcadors tumorals i hormones.
Què és l'assaig radioimmunològic?
Radioimmunoassay (RIA) és un immunoassaig que utilitza elements radioactius per a la formació gradual de complexos antigen-anticossos. Els RIA solen utilitzar anticossos radioactius per detectar la quantitat d'antigen en una mostra. RIA és un assaig in vitro molt específic i molt sensible. El principi de la RIA és la vinculació competitiva. Aquí, un antigen radioactiu competeix contra un antigen no radioactiu per una quantitat constant d'anticossos o llocs d'unió al receptor. La RIA requereix una llicència i precaucions especials, ja que s'utilitzen substàncies radioactives, i segueix sent una de les tècniques menys costoses.
Figura 01: immunoassaig
Durant la RIA, una quantitat coneguda d'antigen es fa radioactiva amb freqüència marcant-la amb isòtops radioactius gamma de iode units a la tirosina. A continuació, aquest antigen es combina amb una quantitat coneguda d'anticossos. Aquí, tant l'antigen com l'anticossos s'uneixen específicament entre si. A continuació, s'afegeix una mostra de sèrum sanguini per iniciar una reacció competitiva entre els antígens marcats i els antígens no marcats del sèrum amb anticossos específics. En aquesta reacció, els anticossos alliberen una certa quantitat d'antigen marcat. Aquesta quantitat és proporcional a la proporció d'antigen marcat i no marcat. Finalment, es genera una corba d'unió per obtenir la quantitat d'antigen en el sèrum sanguini d'un pacient.
Què és l'assaig immunoradiomètric?
L'assaig immunoradiomètric (IRMA) és un immunoassaig que utilitza anticossos radiomarcats. A IRMA, els anticossos es marquen amb radioisòtops. Aquests anticossos s'uneixen als antígens presents en una mostra específica. En una mostra positiva, els anticossos que estan marcats radioactivament s'uneixen als epítops lliures dels antígens. Això forma un complex antigen-anticossos.
Durant la segona reacció, els anticossos marcats que no estan units s'eliminen mitjançant un antigen en fase sòlida. El nombre restant d'anticossos radioactius a la solució és una funció directa de la concentració d'antigen. IRMA es coneix com a assaig d'excés de reactiu on s'utilitza una quantitat excessiva d'anticossos radiomarcats com a reactiu. Aquí, es deixa reaccionar una concentració excessiva d'anticossos o antigen marcats. Com a pas final, els anticossos lliures i units a l'antigen es separen i la fracció unida a l'antigen es sotmet a assaigs radioactius. Aquí, l'activitat de la fracció és directament proporcional a la concentració de l'antigen.
Quines són les similituds entre el radioimmunoassaig i l'assaig immunoradiomètric?
- Tant els radioimmunoassaigs com els immunoradiomètrics són immunoassajos que utilitzen elements radioactius en la formació gradual de complexos antigen-anticossos.
- Formen un complex antigen-anticossos.
Quina diferència hi ha entre l'assaig radioimmunològic i l'assaig immunoradiomètric?
Radioimmunoassay és un immunoassaig que determina els nivells d'anticossos mitjançant un antigen marcat amb un radioisòtop, mentre que l'assaig immunoradiomètric és un assaig d'excés de reactius que utilitza una concentració excessiva d'anticossos radiomarcats. Per tant, aquesta és la diferència clau entre el radioimmunoassaig i el test immunoradiomètric. IRMA és capaç de proporcionar una sensibilitat més alta que RIA. A la RIA, els antígens s'etiqueten amb isòtops radioactius de iode, mentre que als anticossos IRMA, s'etiqueten amb isòtops de iode. Per tant, aquesta també és una diferència entre el radioimmunoassaig i el test immunoradiomètric. Com que l'IRMA és una tècnica d'excés de reactius, l'assaig es realitza en un temps més curt que el RIA.
La taula següent resumeix les diferències entre el radioimmunoassaig i l'assaig immunoradiomètric.
Resum: radioimmunoassaig versus assaig immunoradiomètric
Radioimmunoassay és un immunoassaig que utilitza elements radioactius en formació gradual per determinar els nivells d'anticossos. La RIA sol utilitzar anticossos radioactius. Un antigen radioactiu competeix amb un antigen no radioactiu per una quantitat constant d'anticossos o llocs d'unió al receptor. L'assaig immunoradiomètric és un immunoassaig realitzat per determinar els nivells d'antigen d'una mostra mitjançant anticossos radiomarcats. Aquests anticossos s'uneixen als antígens presents en una mostra específica. Al final de cada assaig, es forma un complex antigen-anticossos. Per obtenir els resultats dels assaigs, es dibuixa una corba d'enllaç. En el radioimmunoassaig, la quantitat d'antigen marcat és proporcional a la proporció d'antigen marcat i no marcat, però en un assaig immunoradiomètric, l'activitat de la fracció unida a l'antigen és directament proporcional a la concentració de l'antigen. Aquest és el resum de la diferència entre radioimmunoassaig i assaig immunoradiomètric.
