Diferència clau: tinció de Gram vs cultura
La tinció de Gram és una tècnica de tinció que es realitza per diferenciar els bacteris en dos grups segons el gruix de la capa de peptidoglicà de la seva paret cel·lular. El cultiu és un mètode per fer créixer i mantenir microorganismes en condicions de laboratori per a diferents anàlisis. La diferència clau entre la tinció de grams i el cultiu és la seva funció; soca gram una tècnica de tinció de bacteris on el cultiu és un mètode per fer créixer i mantenir microorganismes.
Què és la taca de Gram?
La tinció de Gram és una tècnica de tinció diferencial important utilitzada per a la identificació de bacteris en Microbiologia. Aquesta tècnica va ser introduïda pel bacteriòleg danès Hans Christian Gram l'any 1884. La tinció de Gram classifica els bacteris en dos grans grups: grampositius i gramnegatius; aquests són molt importants en la classificació i identificació bacteriana. La tinció de Gram es realitza com a pas inicial per a la caracterització bacteriana.
Els bacteris s'agrupen en funció de les diferències de la seva paret cel·lular. Els bacteris Gram positius contenen una capa gruixuda de peptidoglicà a la seva paret cel·lular mentre que els bacteris Gram negatius contenen una fina capa de peptidoglicà a la seva paret cel·lular, tal com es mostra a la figura 01. El resultat de la tinció de Gram es basarà en la diferència de gruix de la capa de peptidoglicà del paret cel·lular.
Figura 1: bacteris grampositius i bacteris gramnegatius
La tinció de Grams es realitza amb quatre reactius diferents, a saber; taca primària, mordent, agent decolorant i contrataca. El violeta de cristall i la safranina serveixen com a taques primàries i de contratació, respectivament, mentre que els grams de iode i el 95% d'alcohol serveixen com a mordent i decolorant, respectivament.
Pasos bàsics de la taca de grams
- Es prepara un frotis bacterian sobre un portaobjectes de vidre net, es fixa amb calor i es refreda.
- El frotis s'inunda amb cristall violeta durant 1 o 2 minuts.
- El frotis s'esbandeix amb aigua corrent lent de l'aixeta per eliminar l'excés de taques.
- S'aplica grams de iode al frotis durant 1 minut.
- El frotis s'esbandeix amb aigua de l'aixeta corrent lent
- El frotis es renta amb alcohol al 95% durant 2-5 segons i es renta amb aigua de l'aixeta corrent lent.
- El frotis es taca amb safranina durant 1 minut
- El frotis s'esbandeix amb aigua corrent lent de l'aixeta, s'asseca i s'observa al microscopi.
Al final de la tinció de grams, els bacteris gramnegatius s'observaran en color rosa mentre que els bacteris grams positius s'observaran en color morat, tal com es mostra a la figura 02. El resultat de la tinció de grams es decideix pel gruix. de la capa de peptidoglicà de la seva paret cel·lular. Durant l'etapa de decoloració, la taca primària i el mordent s'eliminen fàcilment dels bacteris gramnegatius i es tornen incolors ja que tenen una fina capa de peptidoglicà. La taca primària es manté en els bacteris gram-positius ja que tenen una capa gruixuda de peptidoglicà. La contrataca no serà efectiva per als bacteris gram-positius a causa de la retenció de la taca primària. Així, els bacteris grams positius seran visibles en el color primari de la taca, és a dir, el color porpra. La contrataca tacarà els bacteris gramnegatius i serà visible amb el color de la selecció, que és el color de la safranina. Per tant, és fàcil classificar els bacteris en dos grups per la tinció de Gram i és valuós en la diferenciació i identificació bacteriana.
Figura 2: Soca Gram
Què és la cultura?
El cultiu microbià és un mètode de cultiu i manteniment de microorganismes en condicions de laboratori amb diferents finalitats. Els cultius es cultiven en medis sòlids, semisòlids i líquids segons el tipus i la finalitat del cultiu del microorganisme. Els cultius reben els nutrients necessaris i les condicions de creixement requerides pels microorganismes. Hi ha diferents components d'un medi de cultiu com ara font d'energia, font de carboni, font de nitrogen, minerals, micronutrients, aigua, agent solidificant, etc. La temperatura òptima, l'oxigen i el pH s'han d'ajustar segons el tipus de microorganisme cultivat.
Hi ha diferents tipus de cultius microbians; per exemple, cultiu per lots, cultiu continu, cultiu a punyalada, cultiu en placa d'agar, cultiu en caldo, etc. Segons la composició del medi de cultiu, hi ha diferents tipus de medis de cultiu coneguts com a medis sintètics, medis semisintètics i medis naturals. Els cultius microbians es preparen en condicions estèrils dins d'una cambra especial anomenada flux d'aire laminar. El medi de cultiu i la cristalleria s'esterileixen abans de la inoculació del microorganisme desitjat. En condicions estèrils adequades, el microorganisme objectiu es transfereix al medi nutritiu esterilitzat i s'incuba a la temperatura òptima. Dins del medi, el microorganisme creixerà i es multiplicarà amb els nutrients proporcionats.
Figura 3: un cultiu bacterià en placa
Quina diferència hi ha entre la tinció de Gram i la cultura?
Taca de Gram vs Cultura |
|
| La soca Grams és una tècnica de tinció diferencial utilitzada per a la diferenciació i identificació bacteriana. | El cultiu microbià és un mètode per fer créixer microorganismes al laboratori. |
| Components | |
| Això fa servir diferents reactius, incloses dues taques. | Això utilitza diferents medis de cultiu, com ara medis sòlids, semisòlids i líquids composts de nutrients i altres condicions necessàries. |
| Funcions bàsiques | |
| Això permet agrupar els bacteris en dos grups: grams negatius i grams positius. | Això permet la multiplicació de microorganismes amb diferents finalitats. |
| Base | |
| El resultat de la tinció de Gram es basa en les diferències en la capa de peptidoglicà de la paret cel·lular. | Els microorganismes creixeran i es multiplicaran dins dels medis de cultiu. |
| Resultat | |
| Els bacteris Gram negatius són visibles en color rosa i els bacteris Gram positius són visibles en color morat. | A les plaques es poden veure colònies dels microorganismes. En medis líquids, els microorganismes es troben en suspensió. |
Resum: tinció de Gram vs cultura
Els cultius microbians es preparen i es mantenen en condicions de laboratori amb diferents finalitats, com ara emmagatzematge, proves, purificació química, etc. La tinció de Gram és un procediment de tinció que diferencia els bacteris en dos grups principals anomenats bacteris Gram negatius i bacteris Gram positius. Per tant, la diferència entre la tinció de grams i el cultiu és que la tinció de grams és una tècnica de tinció de bacteris mentre que el cultiu és un mètode per fer créixer i mantenir microorganismes als laboratoris.
