La diferència clau entre l'elució isocràtica i el gradient és que l'elució isocràtica es refereix a mantenir una concentració constant en la fase mòbil, mentre que l'elució en gradient es refereix a mantenir una concentració variable en la fase mòbil.
Els termes elució isocràtica i gradient s'utilitzen en cromatografia. Durant un recorregut cromatogràfic, utilitzem una fase estacionària, que és una substància immòbil, juntament amb una fase mòbil, la substància en moviment. L'elució isocràtica i de gradient descriu les propietats de la fase mòbil.
Què és l'elució isocràtica?
Elució isocràtica és un terme utilitzat en cromatografia quan la fase mòbil té una concentració constant. Aquí, la concentració de la fase mòbil és constant durant tot el procés cromatogràfic. En aquest procés, podem observar que l'amplada del pic augmenta amb el temps de retenció de manera lineal al cromatograma. Tanmateix, això comporta un desavantatge: els pics d'elució tardana per a l'elució tardana es tornen molt plans i amples. Per tant, es fa difícil reconèixer aquests pics amplis com a pics.
A més, en l'elució isocràtica, la selectivitat no varia segons les dimensions de la columna. Això vol dir que la selectivitat no depèn dels canvis en les dimensions de la columna. Aquí, la longitud i el diàmetre es consideren dimensions de columna. Per tant, els pics elueixen en el mateix ordre.
Què és l'elució de gradient?
Elució de gradient és un terme utilitzat en cromatografia quan aquí la fase mòbil té una concentració variable. En altres paraules, la concentració de la fase mòbil no ha de romandre constant. Per exemple, en HPLC, un mètode de separació comú utilitza metanol al 10% inicialment i acaba al 90%, augmentant la concentració gradualment. La fase mòbil té dos components: un dissolvent feble i un dissolvent fort. El dissolvent feble permet que el solut elueixi lentament mentre que el dissolvent fort provoca l'elució ràpida del solut. En la cromatografia en fase inversa, utilitzem aigua com a dissolvent feble i dissolvent orgànic com a dissolvent fort.
Figura 01: HPLC
A més, el mètode d'elució en gradient disminueix els components d'elució posteriors per fer-los eluir més ràpidament, donant un pic estret al cromatograma. Aquest mètode millora la forma i l'alçada del pic també. A més, en la tècnica d'elució en gradient, l'ordre d'elució canvia amb els canvis en les dimensions de la columna.
Quina diferència hi ha entre l'elució isocràtica i de gradient?
Els termes elució isocràtica i gradient s'utilitzen en cromatografia. L'elució isocràtica i el gradient descriuen les propietats de la fase mòbil. La diferència clau entre l'elució isocràtica i el gradient és que l'elució isocràtica es refereix al manteniment d'una concentració constant en la fase mòbil, mentre que l'elució en gradient es refereix al manteniment d'una concentració variable en la fase mòbil.
En la tècnica d'elució isocràtica, l'amplada del pic augmenta linealment amb el temps de retenció. Tanmateix, en la tècnica d'elució en gradient, la retenció dels components d'elució posterior es redueix, de manera que l'elució es fa més ràpida i dóna pics estrets. A part d'això, en l'elució isocràtica, la selectivitat no depèn de les dimensions de la columna, però en l'elució en gradient, la selectivitat canvia amb les dimensions de la columna canviants.
La taula següent resumeix la diferència entre l'elució isocràtica i el gradient.
Resum: elució isocràtica vs gradient
L'elució isocràtica i l'elució en gradient descriuen les propietats de la fase mòbil. La diferència clau entre l'elució isocràtica i el gradient és que l'elució isocràtica es refereix al manteniment d'una concentració constant en la fase mòbil, mentre que l'elució en gradient es refereix al manteniment d'una concentració variable en la fase mòbil.
