La diferència clau entre la immunoprecipitació i la coimmunoprecipitació és que la immunoprecipitació és una tècnica que precipita una proteïna fora de la solució mitjançant un anticòs específic, mentre que la coimmunoprecipitació és una tècnica que precipita complexos de proteïnes intactes de la solució mitjançant un anticòs específic.
La interacció antigen-anticossos és una interacció química específica entre els anticossos produïts per les cèl·lules B i els antígens (proteïnes) durant una reacció immune. Normalment, els antígens solubles es combinen amb anticossos solubles en presència d'un electròlit a temperatura i pH solubles per tal de fer un complex visible insoluble. Això s'anomena reacció de precipitació. Per tant, la immunoprecipitació i la coimmunoprecipitació són dos tipus de reaccions de precipitació que s'utilitzen habitualment als laboratoris per identificar proteïnes com els antígens.
Què és la immunoprecipitació?
La immunoprecipitació és una tècnica de precipitació d'una proteïna d'una solució mitjançant un anticòs específic. De vegades, aquesta tècnica també es coneix com a immunoprecipitació de proteïnes individuals. La immunoprecipitació utilitza un anticòs per aïllar una proteïna seleccionada d'interès del lisat cel·lular. L'anticòs purifica la seva proteïna o antigen objectiu específic d'una barreja. L'anticossos s'uneix a la proteïna i el complex anticòs-antigen s'extreu de la mostra. En la configuració experimental, el complex antigen-anticossos s'extreu mitjançant agarosa acoblada a proteïnes A/G o perles magnètiques. Més tard, es renten les perles i s'elueix la proteïna d'interès. La proteïna purificada o l'antigen obtingut per immunoprecipitació es verifica mitjançant una varietat de tècniques com l'assaig immunoabsorbent lligat a enzims (ELISA) i el western blot (WB).
Figura 01: Immunoprecipitació
A més, es poden quantificar i identificar proteïnes o antígens aïllats mitjançant espectrometria de masses utilitzant patrons de digestió enzimàtica basats en la seqüència primària. Abans d'iniciar un experiment d'immunoprecipitació s'han de tenir en compte algunes consideracions: elecció del format del mètode, unió de proteïnes i perles, elecció de l'anticòs i isotip primari adequats i control negatiu.
Què és la coimmunoprecipitació?
La coimmunoprecipitació és una tècnica de precipitació de complexos de proteïnes intactes fora de la solució mitjançant un anticòs específic. La coimmunoprecipitació funciona generalment seleccionant un anticòs específic que s'adreça a una proteïna coneguda (antigen) que es creu que és membre d'un complex més gran de proteïnes. En dirigir el membre conegut amb un anticòs específic, és possible treure tot el complex proteic de la solució. Això permet identificar els membres desconeguts del complex. El concepte d'extreure complexos de proteïnes de la solució de vegades es coneix com a mecanisme de "pull-down".
Figura 02: Coimmunoprecipitació B
La coimmunoprecipitació és una tècnica potent que s'utilitza per analitzar les interaccions proteïna-proteïna. L'objectiu principal de la coimmunoprecipitació és la identificació de socis que interactuen com ara lligands, cofactors o molècules de senyalització a la proteïna d'interès. A més, la coimmunoprecipitació és una tècnica eficaç que s'utilitza per separar proteïnes del sèrum, el lisat cel·lular, el teixit homogeneïtzat o el medi condicionat.
Quines similituds hi ha entre la immunoprecipitació i la coimmunoprecipitació?
- La immunoprecipitació i la coimmunoprecipitació són dos tipus de tècniques basades en reaccions de precipitació.
- Les dues tècniques es poden utilitzar per identificar l'antigen diana mitjançant un anticòs específic.
- Les dues tècniques depenen molt de la interacció antigen-anticossos.
- S'utilitzen habitualment als laboratoris clínics.
Quina diferència hi ha entre la immunoprecipitació i la coimmunoprecipitació?
La immunoprecipitació és una tècnica que precipita una proteïna fora de la solució mitjançant un anticòs específic, mentre que la coimmunoprecipitació és una tècnica que precipita complexos de proteïnes intactes fora de la solució mitjançant un anticòs específic. Per tant, aquesta és la diferència clau entre la immunoprecipitació i la coimmunoprecipitació. A més, la immunoprecipitació s'utilitza més habitualment als laboratoris, mentre que la coimmunoprecipitació no s'utilitza habitualment als laboratoris.
La infografia següent presenta les diferències entre la immunoprecipitació i la coimmunoprecipitació en forma de taula per comparar-les.
Resum: Immunoprecipitació vs Coimmunoprecipitació
La immunoprecipitació i la coimmunoprecipitació són dos tipus de tècniques basades en reaccions de precipitació que depenen de la interacció antigen-anticossos. La tècnica d'immunoprecipitació precipita una proteïna fora de la solució mitjançant un anticòs específic, mentre que la tècnica de coimmunoprecipitació precipita complexos de proteïnes intactes fora de la solució mitjançant un anticòs específic. Per tant, això resumeix la diferència entre la immunoprecipitació i la coimmunoprecipitació.
