Diferència clau: vectors YAC vs BAC
Els vectors s'utilitzen en la clonació molecular. Un vector es pot definir com una molècula d'ADN que es comporta com un vehicle per transportar material genètic estrany a una altra cèl·lula. Un vector que conté ADN estrany es coneix com ADN recombinant i hauria de tenir la capacitat de replicar-lo i expressar-lo dins de l'organisme hoste. El cromosoma artificial de llevat (YAC) i el cromosoma artificial bacterian (BAC) són dos tipus de vectors implicats en la clonació. La diferència clau entre YAC i BAC és que YAC és un sistema vectorial construït artificialment que utilitza una regió específica del cromosoma del llevat per inserir grans segments de materials genètics a les cèl·lules del llevat, mentre que BAC és un sistema vectorial construït artificialment que utilitza una regió específica de E.coli per inserir grans segments d'ADN a les cèl·lules d'E. coli.
Què són els vectors YAC?
YAC (cromosoma artificial de llevat) és un cromosoma construït artificialment que té la capacitat de transportar un gran segment d'ADN estrany i replicar-se dins de les cèl·lules del llevat. Té un centròmer, telòmers i seqüències de replicació autònoma que són essencials per a la replicació i l'estabilitat. El YAC també hauria de portar un marcador o marcadors selectius i llocs de restricció per convertir-lo en un vector de clonació eficaç. Una gran seqüència que va des de 1000 kb a 2000 kb es pot inserir a YAC i transferir-se al llevat. L'eficiència de transformació de YAC és molt baixa.
Figura 01: Vector YAC
Què són els vectors BAC?
El cromosoma artificial bacterià (BAC) és un cromosoma construït artificialment per a la clonació molecular. Té regions específiques del plasmidi F d'E. coli i és circular i súper enrotllat. El BAC es desenvolupa per clonar fragments d'ADN a bacteris, especialment a E. coli. Pot contenir fragments d'ADN amb mides de fins a 300 kb. En comparació amb YAC, les insercions de clonació de BAC són de mides més petites. Els BAC es van desenvolupar l'any 1992 i encara és popular per la seva estabilitat i facilitat de construcció. Els BAC també són útils per desenvolupar vacunes.
Figura 02: Vector BAC en la clonació molecular
Quina diferència hi ha entre els vectors YAC i BAC?
YAC vs BAC Vectors |
|
| YAC és un cromosoma modificat genèticament amb l'ús d'ADN de llevat per a la clonació. | BAC és una molècula d'ADN modificada genèticament que utilitza ADN d'E. coli per a la clonació. |
| Gènere | |
| Els YAC es van dissenyar per clonar grans fragments d'ADN genòmic en llevats. | Es van desenvolupar BAC per clonar grans fragments genòmics a Escherichia coli. |
| Insereix longitud | |
| Els YAC poden contenir insercions genòmiques de mida megabase. (1000 kb – 2000 kb). | Els BAC poden incloure insercions de 200 a 300 kb o menys. |
| Construcció | |
| El DNA YAC és difícil de purificar intacte i requereix una alta concentració per generar un sistema vectorial YAC. | BAC és fàcil de purificar intacte i es pot construir fàcilment. |
| Quimerisme | |
| Els YAC solen ser quimèrics. | Els BAC rarament són quimèrics. |
| Estabilitat | |
| YAC és inestable. | BAC és estable. |
| Modificacions | |
| La recombinació de llevats és molt factible i sempre roman activa. Per tant, pot generar supressions i altres reordenacions en un YAC. | E. coli s'impedeix i s'activa quan cal. Per tant, redueix els reordenaments no desitjats als BAC. |
| Manteniment | |
| La manipulació de YAC recombinants sol requerir la transferència de YAC a E. coli per a la seva manipulació posterior. Per tant, és un procés laboriós. | La modificació BAC es produeix directament a E. coli. Per tant, no hi ha necessitat de transferència d'ADN. Per tant, el procés no és laboriós. |
Resum: vectors YAC vs BAC
YAC s'ha convertit en una eina de recerca essencial en els processos de clonació a causa de la seva capacitat per clonar grans fragments d'ADN a l'organisme hoste. No obstant això, els YAC tenen diversos inconvenients com a vectors com ara dificultats de construcció, quimerisme, inestabilitat, etc. Per tant, per superar aquests problemes, els científics han desenvolupat vectors BAC. El BAC s'ha construït utilitzant regions específiques del cromosoma E. coli. És un vector estable i es pot construir fàcilment. No obstant això, la longitud de l'ADN que pot manejar BAC és fins a 20 vegades menor que la de YAC. Aquesta és la diferència entre els sistemes vectorials YAC i BAC. Avui en dia, als laboratoris es prefereix més el BAC que el YAC.
