La diferència clau entre els vectors d'inserció i de substitució és que el vector d'inserció té la capacitat d'inserir longituds moderades d'ADN estranger mentre que el vector de substitució té la capacitat d'acomodar longituds més grans d'ADN estranger.
Els vectors fags són els bacteriòfags utilitzats per a la clonació. Hi ha dos tipus de vectors fags; són vector d'inserció i vector de substitució. A més, tots els vectors fags consisteixen en gens no essencials. Tanmateix, aquests gens s'han d'eliminar dels fags per facilitar noves insercions d'ADN estrany.
Què és un vector d'inserció?
En primer lloc, el vector d'inserció és la forma més senzilla de vectors de clonació lambda. De fet, és un tipus de vector fag que té un lloc de restricció únic introduït dins del genoma del vector en la posició de l'ADN opcional. A més, l'ADN del fag roman sense eliminar-se. Aquesta no eliminació de l'ADN del fag redueix la mida de les insercions (ADN estranger) a clonar dins del vector. A més, aquests vectors són útils en la clonació i l'expressió d'ADNc. GT10, GT11 i Zap són exemples d'aquest vector.
Figura 01: Fag Lambda
El vector d'inserció consta d'un únic lloc de reconeixement. La funció principal d'aquest vector és desenvolupar biblioteques d'ADNc derivades de seqüències d'ARNm eucariotes. A més, només pot acomodar longituds d'ADN estranger que oscil·len entre 05 i 11 kb. A més, posseeix un lloc d'escissió únic per a la inserció d'ADN estrany.
Què són els vectors de substitució?
El vector de substitució o vector de substitució és un tipus de vector de fags desenvolupat a partir de l'eliminació d'una regió mitjana del "fragment de farciment" de l'ADN del fag. La inserció d'ADN estrany desitjada substitueix l'ADN del fag.
Figura 02: Vector de substitució
Els vectors de substitució són importants per crear biblioteques genòmiques com ara EMBL4 i Charon40. Aquests vectors poden acomodar una longitud més gran d'ADN estranger que oscil·la entre 08 i 24 kb de longitud. La regió de farciment també consta d'un gen que fa que el vector fag no sigui viable dins d'un hoste bacterià.
Quines similituds hi ha entre els vectors d'inserció i de substitució?
- Els vectors d'inserció i substitució són vectors de fags.
- Ambdós vectors acomoden insercions d'ADN estrany.
- Tots dos són útils per crear biblioteques d'ADN.
Quina diferència hi ha entre els vectors d'inserció i de substitució?
Inserció i vectors de substitució |
|
| El vector d'inserció és un tipus de vector fag que té un lloc de restricció introduït dins del genoma del fag al lloc de l'ADN opcional. | El vector de reemplaçament és un tipus de vector de fags desenvolupat a partir de l'eliminació d'una regió mitjana del "fragment de farciment" de l'ADN del fag |
| Mida dels fragments d'inserció | |
| 05-11 kb de longitud | 08-24 kb de longitud |
| Fragment de farciment | |
| Sense fragment de farciment | El fragment de farciment se substitueix per una inserció estrangera |
| Funció | |
| Important per crear biblioteques d'ADNc | Important per crear biblioteques de genomes |
| Exemples | |
| GT10, GT11 i Zap en són exemples | EMBL4 i Charon40 en són exemples |
| Cleavage Site | |
| Hi ha un lloc d'escissió únic | El lloc d'escissió conté gens que no són essencials per al cicle lític |
Resum: inserció i vectors de substitució
Tant els vectors d'inserció com els de substitució són dos tipus de vectors de fags. Tots dos vectors tenen llocs de restricció que faciliten l'allotjament de nous inserts d'ADN estranger. Els vectors d'inserció són importants per crear biblioteques d'ADNc, mentre que els vectors de substitució són importants per crear biblioteques genòmiques. A més, els vectors d'inserció acomoden insercions d'ADN amb una longitud moderada. Però els vectors de substitució poden acomodar longituds més altes d'insercions d'ADN estrangers. En general, aquesta és la diferència clau entre els vectors d'inserció i de substitució.
