Diferència clau: transformants i recombinants
La recombinació i la transformació són dos passos crucials en l'enginyeria genètica, on les característiques d'un organisme es modifiquen deliberadament manipulant el seu material genètic. La recombinació és un procés en què l'ADN estrany s'incorpora a un genoma vectorial i es forma una molècula d'ADN recombinant. La transformació és el següent pas en què la molècula recombinant s'introdueix a l'organisme hoste. La cèl·lula hoste o l'organisme facilita l'expressió de la molècula recombinant. La diferència clau entre transformants i recombinants és que els transformants són les cèl·lules o els organismes que prenen molècules recombinants a l'interior i faciliten l'expressió, mentre que els recombinants són els vectors que permeten la inserció de l'ADN estrany al seu genoma i el transport als transformants hoste per a l'expressió.
Què són els transformants?
Els transformants són les cèl·lules o els organismes en els quals s'agafa l'ADN recombinant per a l'expressió. Els bacteris s'utilitzen habitualment com a organismes hostes en enginyeria genètica, ja que són fàcils de créixer, multiplicar-se i manejar en condicions de laboratori i el procés de transformació és fàcil en comparació amb altres organismes. El bacteri hoste més popular utilitzat en enginyeria genètica és el bacteri E coli.
Durant el procés de transformació, les cèl·lules hostes són induïdes a absorbir els recombinants. No obstant això, algunes cèl·lules hostes no absorbeixen molècules recombinants. Es coneixen com a no transformants i les cèl·lules que contenen molècules d'ADN recombinant al seu interior es coneixen com a transformants. La selecció de transformants a partir de no transformants es fa mitjançant marcadors seleccionables en biologia molecular. Els marcadors seleccionables s'insereixen al genoma del vector juntament amb l'inserció d'ADN. Els marcadors seleccionables utilitzats habitualment són els gens resistents als antibiòtics. Els gens marcadors faciliten la diferenciació dels transformants i continuen el procés. Després del procés de transformació, el bacteri es cultiva en un medi que conté antibiòtics. Només els transformants són capaços de créixer en aquest medi, ja que tenen els recombinants a l'interior.
Un cop la molècula d'ADN recombinant es transforma dins de l'organisme hoste, l'ADN estrany es pot integrar al genoma de la cèl·lula hoste o romandre no integrat al citoplasma. Tanmateix, l'expressió i la replicació de l'ADN estrany es produeixen a l'organisme hoste i produeixen el resultat desitjat del procés.
Què són els recombinants?
Un recombinant és un organisme o una cèl·lula que posseeix un genoma recombinat que conté ADN estrany. Els recombinants són el resultat del procés d'enginyeria genètica. Es construeixen artificialment in vitro mitjançant la inserció dels gens d'interès i la modificació del genoma. Sovint, els plasmidis i bacteriòfags bacterians actuen com a recombinants en enginyeria genètica. Té quimera de diferents ADN. La molècula d'ADN recombinant transporta l'ADN estrany a l'organisme hoste i el fa expressar i formar el producte desitjat.
Les molècules recombinants es construeixen mitjançant endonucleases de restricció i ADN lligases. El fragment d'ADN desitjat es separa de l'organisme original i s'insereix al vector per fer el recombinant per a la transformació. El tall del gen d'interès i l'obertura de l'organisme vector s'han de fer utilitzant el mateix enzim de restricció per crear extrems enganxosos compatibles per unir-los. Una vegada que l'ADN estrany s'incorpora al genoma del vector, es coneix com a molècula d'ADN recombinant o recombinant.
Figura 02: ADN recombinant
Quina diferència hi ha entre transformants i recombinants?
Transformants vs recombinants |
|
| Els transformants són les cèl·lules que tenen una molècula d'ADN recombinant al seu interior. | Els recombinants són les molècules portadores que tenen ADN estrany inserit al propi genoma. |
| Expressió d'ADN estranger | |
| Són les cèl·lules hoste que són capaços d'expressar l'ADN recombinant. | Haurien de ser capaços d'autoreplicar-se dins de l'organisme hoste. |
| Selecció | |
| Les cèl·lules que es poden fer créixer i multiplicar fàcilment es seleccionen com a cèl·lules hoste. | S'han de poder extreure fàcilment i han de contenir marcadors seleccionables. |
Resum: transformants i recombinants
Els transformants són les cèl·lules o organismes amb molècules d'ADN recombinant al seu interior. Els recombinants són els organismes o les cèl·lules que han sofert una recombinació genètica i tenen ADN estrany dins dels seus genomes. Les cèl·lules bacterianes s'utilitzen sovint com a cèl·lules hoste per a la transformació i els plasmidis i els bacteriòfags s'utilitzen sovint com a vectors en la tecnologia d'ADN recombinant. Aquesta és la diferència entre transformants i recombinants.
