La diferència clau entre ELISA competitiu i no competitiu és que l'ELISA competitiu utilitza un antigen d'inhibició mentre que l'ELISA no competitiu no utilitza un antigen d'inhibició per a l'assaig.
Assaig immunoabsorbent lligat a enzims (ELISA) és un assaig immunològic que detecta diverses dianes com ara anticossos, antígens, proteïnes i glicoproteïnes. És un mètode ràpid i senzill de realitzar. Per tant, s'utilitza més sovint amb finalitats d'investigació i diagnòstic. ELISA implica l'ús d'enzims i la unió específica d'anticossos i antigen. Segons com es produeixen les reaccions, hi ha quatre tipus d'ELISA: ELISA directe, ELISA indirecte, ELISA sandvitx i ELISA d'inhibició. ELISA directe, indirecte i sandvitx són tipus d'ELISA no competitius mentre que l'ELISA d'inhibició és un tipus d'ELISA complet. L'objectiu principal d'aquest article és discutir la diferència entre ELISA competitiu i no competitiu.
Què és ELISA competitiu?
ELISA competitiu mesura la concentració d'antigen en una mostra mitjançant la detecció d'interferències de senyal. Aquí, l'assaig utilitza un antigen inhibidor. Per tant, és un tipus d'ELISA d'inhibició. Durant aquest procediment, els antígens presents a la mostra competeixen amb l'antigen de referència seleccionat per unir-se a una quantitat específica d'anticossos marcats. A més, aquest procediment s'inicia amb la incubació de la mostra, amb l'excés d'anticòs marcat. A més, l'antigen de referència s'ha de recobrir prèviament en una placa d'assaig de pous múltiples. A continuació, s'ha d'afegir la barreja de mostra a la placa d'assaig que conté l'antigen de referència. Els anticossos lliures s'uniran a l'antigen de referència en funció de la quantitat d'antigen de la mostra. Per tant, si hi ha més antigen de mostra, es detectarà menys antigen de referència. Per tant, crea un senyal més feble.
Figura 01: ELISA
En canvi, quan la mostra conté menys quantitat d'antigen, cada cop més antigen de referència ocuparà els anticossos i donarà un senyal fort. Com que ELISA competitiu dóna un senyal més fort quan la mostra conté una quantitat baixa d'antígens, ELISA competitiu és un assaig molt sensible, fins i tot per a mostres amb un nombre reduït d'antígens.
En alguns kits ELISA competitius, s'utilitza un antigen marcat en lloc d'un anticòs marcat. Aquí, l'antigen marcat i l'antigen de la mostra competiran per unir-se a l'anticòs primari. De la mateixa manera, quan la quantitat d'antigen a la mostra és baixa, la quantitat d'antigen marcat que s'uneix als anticossos serà més gran i crearà un senyal més fort.
Què és ELISA no competitiu?
Entre els quatre tipus d'ELISA, tres són ELISA no competitius. Són ELISA directe, ELISA indirecte i ELISA sandvitx. Els tres formats funcionen sota el principi comú d'ELISA amb lleus diferències en les seves metodologies.
Direct ELISA utilitza un anticòs primari marcat amb enzims. Per tant, no requereix un anticòs secundari. Per tant, l'ELISA directe és més ràpid que altres tipus d'ELISA. L'anticòs primari s'uneix directament a l'antigen objectiu immobilitzat que està present a la placa. Per tant, la reacció enzim-substrat es produirà, produint un senyal visible.
Figura 02: ELISA entrepà
A diferència de l'ELISA directe, l'ELISA indirecte utilitza un anticòs primari no marcat i un anticòs secundari marcat amb enzim. Una vegada que l'anticòs primari s'uneix a l'antigen immobilitzat, l'anticossos secundari s'uneix a l'anticòs primari. L'enzim de l'anticòs secundari reaccionarà amb l'antigen i produirà un senyal visible. L'ELISA sandvitx és diferent de l'ELISA directe i indirecte. Aquí, l'anticossos està immobilitzat a la paret de la placa d'assaig.
Quines són les similituds entre ELISA competitiu i no competitiu?
- ELISA competitiu i no competitiu són dos tipus de tècniques d'assaig immunoabsorbent.
- Són tècniques molt flexibles i sensibles.
- A més, tant els ELISA competitius com els no competitius són immunoassaigs lligats a enzims.
- A més, tots dos mètodes generen un senyal a causa d'una reacció enzimàtica-substrat.
Quina diferència hi ha entre ELISA competitiu i no competitiu?
ELISA competitiu és un tipus d'ELISA que es basa en la finalització entre l'antigen de l'analit i l'antigen marcat per a una quantitat limitada d'anticossos específics. D' altra banda, no existeix aquesta competència entre l'antigen d'interès i l'antigen de referència en ELISA no competitiu. Per tant, aquesta és la diferència clau entre ELISA competitiu i no competitiu. De la mateixa manera, ELISA competitiu és un ELISA d'inhibició mentre que l'ELISA no competitiu no és un ELISA d'inhibició. Per tant, aquesta també és una diferència entre ELISA competitiu i no competitiu.
A més, l'ELISA competitiu és més adequat per mesurar una quantitat baixa d'antigen d'interès. És un mètode sensible. D' altra banda, ELISA no competitiu no depèn del nombre d'antígens presents en una mostra. Per tant, aquesta també és una diferència entre ELISA competitiu i no competitiu.
A continuació, la infografia explica la diferència entre ELISA competitiu i no competitiu comparativament.
Resum: ELISA competitiu i no competitiu
ELISA competitiu i no competitiu són els dos tipus principals d'ELISA o assaigs immunoabsorbents lligats a enzims. En resumir la diferència entre ELISA competitiu i no competitiu, l'ELISA competitiu es basa en la competència entre l'antigen d'interès i l'antigen de referència cap a la quantitat limitada d'anticossos. Per tant, ELISA competitiu també s'anomena ELISA d'inhibició. D' altra banda, ELISA no competitiu no es basa en la competència entre antígens diana i antígens de referència. Utilitza un excés d'anticossos específics marcats cap a l'analit d'interès. Per tant, aquesta és la diferència clau entre ELISA competitiu i no competitiu. ELISA directe, ELISA indirecte i ELISA sandvitx són els tres tipus principals d'ELISA no competitius.
