La diferència clau entre Elisa i Elispot és que Elisa és un assaig immunosorbent lligat a enzims que determina la concentració total de proteïnes de senyalització secretades, mentre que Elispot és un assaig immunosorbent lligat a enzims que detecta cèl·lules secretores de citocines individuals.
Elisa i Elispot són dos assajos immunosorbents lligats a enzims àmpliament utilitzats en medicina, patologia vegetal, biotecnologia i diferents indústries farmacèutiques. En aquestes tècniques, un analit proteic és detectat per un anticòs dirigit contra ell. Elisa és l'assaig immunoabsorbent lligat a enzims més popular utilitzat als laboratoris. D' altra banda, Elispot és un assaig immunosorbent lligat a enzims que no s'utilitza en lloc d'Elisa sinó que s'utilitza a més d'Elisa als laboratoris.
Què és Elisa Assay?
Elisa és un assaig immunoabsorbent lligat a enzims que determina la concentració total de proteïnes de senyalització secretades. És un assaig de bioquímica analítica àmpliament utilitzat que va ser descrit per primera vegada per Engvall i Perlmann l'any 1971. Aquesta tècnica utilitza un tipus d'immunoassaig enzimàtic en fase sòlida per detectar la presència d'una proteïna específica en una mostra líquida mitjançant anticossos dirigits contra aquesta proteïna específica. Aquest assaig és una eina de diagnòstic d'ús habitual en medicina, patologia vegetal i biotecnologia.
Mecanisme de la prova ELISA
En la majoria de la prova ELISA, una quantitat desconeguda d'antigen s'immobilitza al principi sobre un suport sòlid (placa de microlitres). A continuació, s'aplica l'anticòs primari coincident sobre la superfície de suport sòlida. Aquest anticòs forma un complex amb l'antigen (complex antigen-anticossos). L'anticòs primari unit a l'antigen es pot detectar mitjançant un anticòs secundari que s'enllaça a un enzim mitjançant la bioconjugació. En el pas final de la prova Elisa, s'afegeix una substància que conté el substrat de l'enzim. Si hi ha una unió adequada d'un anticòs primari a l'antigen, el substrat produeix un canvi de color detectable. En definitiva, això quantifica l'antigen de la mostra.
Figura 01: diferents tipus d'Elisa
A més, hi ha diferents enfocaments d'Elisa, com ara Elisa directa i Elisa indirecta. Actualment, s'utilitzen diverses proves Elisa per detectar patògens humans com Mycobacterium tuberculosis, rotavirus, virus de l'hepatitis B, virus de l'hepatitis C, E.coli productor d'enterotoxines, VIH i SARS-CoV-2.
Què és el test Elispot?
Elispot és un assaig immunoabsorbent lligat a enzims que detecta cèl·lules secretores de citocines individuals. Cecil Czerkinsky va descriure per primera vegada ELISpot el 1983. És un tipus d'assaig que se centra a mesurar quantitativament la freqüència de secreció de citocines per a una sola cèl·lula. També es classifica com una tècnica que utilitza anticossos per detectar un analit proteic biològic o químic. El test Fluorospot és una variació del test Elispot, que utilitza la fluorescència per analitzar diversos analits (proteïnes més secretes).
Mecanisme de prova d'Elispot
En aquest mecanisme, inicialment s'afegeixen anticossos monoclonals específics de citocines als pous de les plaques de microlitres. A continuació, les cèl·lules desitjades que s'observen s'afegeixen als pous. Més tard, les cèl·lules s'incuben. Durant la incubació cel·lular, es deixa que les cèl·lules reaccionin a qualsevol estímul i segreguin citocines. Les citocines que han estat secretades per les cèl·lules incubades s'uniran als anticossos ja que les cèl·lules estan envoltades d'anticossos monoclonals específics de citocines.
Figura 02: assaig Elispot
Per detectar aquests anticossos monoclonals específics de citocines, s'afegeixen anticossos de detecció específics biotinilats al pou. Els anticossos de detecció específics biotinilats capturen els anticossos monoclonals específics de citocines als pous. A més, s'afegeixen conjugats estreptavidina-enzim als pous per unir-se amb els anticossos de detecció. En el pas final, s'afegeixen substrats específics als pous. Les reaccions dels conjugats enzimàtics i dels substrats produeixen taques diferents als pous. Aquests punts diferents es llegeixen en un lector ELISpot automatitzat. Finalment, això calcularà encara més la freqüència de secreció de citocines.
Quines similituds hi ha entre Elisa i Elispot?
- Tots dos són assajos immunosorbents lligats a enzims.
- Tots dos assajos detecten analits proteics específics.
- Aquests assaigs utilitzen anticossos específics per identificar els analits proteics.
- Ambdós assaigs utilitzen enzims i substrats.
- S'utilitzen com a eina de diagnòstic als laboratoris mèdics.
Quina diferència hi ha entre Elisa i Elispot?
Elisa és un assaig immunoabsorbent lligat a enzims que determina la concentració total de proteïnes de senyalització secretades. D' altra banda, Elispot és un assaig immunoabsorbent lligat a enzims que mesura cèl·lules secretores de citocines individuals. Per tant, aquesta és la diferència clau entre Elisa i Elispot. A més, en la prova Elisa, l'antigen s'immobilitza primer en els pous de microlitres. En canvi, a la prova Elispot, l'anticossos s'immobilitza primer als pous de microlitres. Per tant, aquesta és una altra diferència entre Elisa i Elispot.
La infografia següent presenta una anàlisi detallada de la diferència entre Elisa i Elispot en forma de taula.
Resum: Elisa contra Elispot
Elisa i Elispot són dos assajos immunosorbents lligats a enzims àmpliament utilitzats en medicina, patologia vegetal, biotecnologia i diferents indústries farmacèutiques. Elisa detecta la presència d'un lligand (proteïna) en una mostra líquida mitjançant anticossos dirigits contra el lligand a mesurar. El test Elispot és un mètode àmpliament utilitzat per controlar les respostes immunitàries. Detecta cèl·lules secretores de citocines individuals mitjançant anticossos. És alhora una tècnica d'immunoassaig i bioassaig. Per tant, aquest és el resum de la diferència entre Elisa i Elispot.
