Diferència clau: RPMI vs DMEM
La majoria dels estudis de recerca impliquen el cultiu de cèl·lules animals i, per tant, aquests estudis requereixen el manteniment de línies de cèl·lules animals en condicions especials de creixement. El cultiu de cèl·lules animals es realitza àmpliament en estudis farmacològics per identificar el metabolisme de fàrmacs, en el diagnòstic de mal alties i en la investigació del càncer. El medi de cultiu cel·lular és un aspecte important del cultiu de cèl·lules animals. El medi d'àguila modificat de Dulbecco (DMEM) i el medi de l'Institut Memorial Roswell Park (RPMI) són dos medis de cultiu utilitzats en el cultiu de cèl·lules animals. RPMI és un medi utilitzat àmpliament per cultivar cèl·lules de mamífer en cultiu en suspensió. El DMEM és un tipus de medi basal modificat, amb concentracions d'aminoàcids i vitamines augmentades fins a quatre vegades. DMEM s'utilitza en el cultiu de cèl·lules en cultius adherents. La diferència clau entre els dos mitjans és el tipus de cultura dels mitjans. RPMI s'utilitza en cultius en suspensió, mentre que DMEM s'utilitza per cultivar cèl·lules adherides.
Què és RPMI?
RPMI o Roswell Park Memorial Institute Medium també s'anomena RPMI 1640. El nom del mitjà va ser derivat per l'institut on es van descobrir els mitjans. Aquest medi s'utilitza habitualment en el cultiu de cèl·lules animals, especialment per al creixement de cèl·lules de mamífers. Originalment es van desenvolupar per fer créixer limfòcits humans.
Els ingredients següents s'inclouen a l'RPMI.
- Glucosa
- indicador de pH (vermell de fenol)\
- Sals (clorur de sodi, bicarbonat de sodi, fosfat disòdic, clorur de potassi, sulfat de magnesi i nitrat de calci)
- Aminoàcids
- Vitamines (i-inositol, clorur de colina, àcid para-aminobenzoic, àcid fòlic, nicotinamida, clorhidrat de piridoxina, clorhidrat de tiamina, pantotenat de calci, biotina i riboflavina, cianocobalamina)
La característica especial de RPMI és l'augment de la concentració de fosfat en el medi. RPMI s'utilitza en una atmosfera de diòxid de carboni al 5%. Això proporcionarà les condicions màximes i òptimes per al creixement cel·lular. El pH del medi es manté a 8,0 mitjançant el sistema tampó de bicarbonat.
Figura 01: cultiu cel·lular en una placa de Petri
Aplicacions de RPMI al cultiu cel·lular
- Conreu de limfòcits T i B humans, cèl·lules de medul·la òssia i hibridoma.
- S'utilitza per estudiar cèl·lules neoplàsiques humanes.
Què és DMEM?
El medi d'àguila modificat de Dulbecco (DMEM) és un medi modificat que es prepara comercialment. La textura original de la pols mitjana és groga. En DMEM, la concentració de vitamines s'incrementa fins a quatre vegades, augmentant així el contingut de nutrients del medi.
DMEM també es modifica afegint més sals com ara nitrat fèrric, piruvat sòdic i alguns aminoàcids no essencials com la serina i la glicina. També es veu alterada la formulació de la glucosa en els medis. La formulació original es compon de 1000 mg/L de glucosa, mentre que en DMEM, la concentració augmenta fins a 4500 mg/L. DMEM també requereix la suplementació d'un medi sèric, ja que no és un medi complet. Molt sovint, DMEM es complementa amb sèrum boví fetal (FBS). FBS proporciona les proteïnes i els factors de creixement necessaris per al procés de cultiu.
El pH del medi varia amb l'addició de bicarbonat de sodi. El pH del medi abans d'afegir bicarbonat de sodi és al voltant de 6,80 - 7,40, mentre que el pH després d'afegir bicarbonat de sodi es troba entre 7,60 i 8,20. La temperatura d'emmagatzematge del medi és de 2 a 8 0C.
Figura 02: DMEM
Aplicacions de DMEM
- Per estudiar la capacitat de formació de plaques del poliomavirus a les cèl·lules embrionàries de ratolí.
- En estudis d'inhibició de contacte.
- En investigació i anàlisi de cultius de cèl·lules de pollastre.
Quines similituds hi ha entre RPMI i DMEM?
- Tant RPMI com DMEM s'utilitzen en cultiu de cèl·lules animals.
- Tant els mitjans RPMI com els DMEM són formulacions líquides.
- Tant els mitjans RPMI com DMEM contenen els aminoàcids essencials, vitamines i sals inorgàniques necessàries per al creixement.
- Tant els mitjans RPMI com DMEM estan incomplets. Per tant, cal afegir sèrum.
- Tant els mitjans RPMI com DMEM utilitzen glucosa com a font de carboni.
- Tant els mitjans RPMI com els DMEM tenen un pH més alt.
Quina diferència hi ha entre RPMI i DMEM?
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI és un medi utilitzat àmpliament per cultivar cèl·lules de mamífer en un cultiu en suspensió. | DMEM és un tipus modificat de medi basal amb concentracions més elevades d'aminoàcids i vitamines. |
| Presència de fosfats addicionals | |
| Present a RPMI. | Absent a DMEM. |
| Utilitzeu | |
|
S'utilitza per cultivar cèl·lules en cultius adherents. S'acostuma a,
|
| Tipus de cultura | |
| RPMI s'utilitza per a cultius en suspensió. | DMEM s'utilitza per a cultius amb cèl·lules adherides. |
Resum: RPMI vs DMEM
Tant RPMI com DMEM s'utilitzen àmpliament en el cultiu de cèl·lules animals, especialment per cultivar línies de cèl·lules animals, inclosos limfòcits in vitro. El DMEM és un medi basal modificat on hi ha una concentració de nutrients augmentada. RPMI desenvolupat pel Roswell Park Memorial Institute, i també és un medi utilitzat en el cultiu de cèl·lules animals especialment per a limfòcits de mamífers. Tots dos mitjans estan disponibles comercialment. Aquesta és la diferència entre RPMI i DMEM.
