La diferència clau entre la cromatografia d'intercanvi iònic i la cromatografia d'exclusió de mida és que la cromatografia d'intercanvi iònic s'utilitza per analitzar les substàncies iòniques segons la càrrega, mentre que la cromatografia d'exclusió de mida s'utilitza per analitzar molècules grans segons la mida.
La cromatografia és una tècnica analítica que es pot utilitzar per analitzar diferents mescles. Les tècniques cromatogràfiques s'anomenen segons el paràmetre utilitzat per analitzar les substàncies, p. cromatografia d'exclusió de mida, cromatografia d'intercanvi iònic, etc.
Què és la cromatografia d'intercanvi iònic?
La cromatografia d'intercanvi iònic és una tècnica analítica en la qual podem analitzar substàncies iòniques. Sovint és útil analitzar anions i cations inorgànics (és a dir, anions de clorur i nitrat i cations de potassi i sodi). Encara que no és un mètode molt comú, podem analitzar els ions orgànics utilitzant-lo. A més, podem utilitzar aquesta tècnica per a la purificació de proteïnes perquè les proteïnes són molècules carregades a determinats valors de pH. Aquí, utilitzem una fase estacionària sòlida a la qual es poden unir les partícules carregades. Per exemple, podem utilitzar els copolímers de resina poliestirè-divinilbenzè com a suport sòlid.
Figura 01: teoria darrere de la cromatografia d'intercanvi iònic
Per explicar-ho més, la fase estacionària té ions fixos com ara anions sulfat o cations d'amina quaternaris. Cadascun d'ells s'ha d'associar amb un ió contrari (un ió amb càrrega oposada) si volem mantenir la neutralitat d'aquest sistema. Si l'ió contrari és un catió, anomenarem el sistema com a resina d'intercanvi catiònic. Però, si el contraió és un anió, el sistema és una resina d'intercanvi d'anions. A més, hi ha cinc passos principals en la cromatografia d'intercanvi iònic:
- Fase inicial
- Adsorció de l'objectiu
- Inici de l'elució
- Fi de l'elució
- Regeneració
Què és la cromatografia d'exclusió de mida?
La cromatografia d'exclusió de mida o SEC és una tècnica analítica en la qual les molècules d'una mescla es poden separar per la seva mida i pes de molècules. Normalment, funciona amb molècules grans anomenades macromolècules. Normalment, s'utilitza una solució aquosa per a l'anàlisi. Aleshores s'anomena cromatografia de filtració en gel. Quan és un dissolvent orgànic, s'anomena cromatografia de permeació en gel.
La cromatografia de filtració en gel és una forma de cromatografia d'exclusió de mida en la qual utilitzem una solució aquosa com a fase mòbil. Per tant, la fase mòbil que utilitzem sovint en aquesta tècnica és un tampó aquós. A més, fem servir una columna cromatogràfica per a aquesta separació, i hem d'empaquetar la columna amb perles poroses. Normalment, Sephadex i agarosa són útils com a material porós. Per tant, aquests materials són la fase estacionària del nostre experiment. A més, podem utilitzar la mida dels porus d'aquestes perles per determinar la mida de les macromolècules que estem separant. Tanmateix, és només una estimació.
Figura 02: un aparell per a la cromatografia d'exclusió de mida
La cromatografia de permeació en gel és una forma de cromatografia d'exclusió de mida en la qual utilitzem un dissolvent orgànic com a fase mòbil. Per tant, podem utilitzar solucions com l'hexà i el toluè per a aquesta finalitat. La fase estacionària és un material porós, el mateix que en la cromatografia de filtració en gel. Aquesta tècnica s'aplica sovint a polímers i altres materials orgànics solubles. El mètode d'acció de la tècnica és similar al de la cromatografia de filtració en gel.
Quina diferència hi ha entre l'intercanvi iònic i la cromatografia d'exclusió de mida?
La cromatografia és una tècnica analítica que es pot utilitzar per analitzar diferents mescles. La diferència clau entre la cromatografia d'intercanvi iònic i la cromatografia d'exclusió de mida és que la cromatografia d'intercanvi iònic s'utilitza per analitzar les substàncies iòniques segons la càrrega, mentre que la cromatografia d'exclusió de mida s'utilitza per analitzar molècules grans segons la mida.
La infografia a continuació ofereix més informació sobre la diferència entre l'intercanvi iònic i la cromatografia d'exclusió de mida.
Resum: intercanvi iònic vs cromatografia d'exclusió de mida
La cromatografia és una tècnica analítica que es pot utilitzar per analitzar diferents mescles. La diferència clau entre la cromatografia d'intercanvi iònic i la cromatografia d'exclusió de mida és que la cromatografia d'intercanvi iònic s'utilitza per analitzar les substàncies iòniques segons la càrrega, mentre que la cromatografia d'exclusió de mida s'utilitza per analitzar molècules grans segons la mida.
