La diferència clau entre els enzims de restricció EcoRI i HindIII és que EcoRI és un enzim de restricció de tipus II aïllat d'E. coli, mentre que HindIII és un enzim de restricció de tipus II aïllat de Haemophilus influenza.
L'enzim de restricció o l'endonucleasa de restricció és un enzim que escinda l'ADN en fragments en llocs de reconeixement específics (llocs de restricció) dins de la molècula d'ADN. Aquests enzims de restricció es troben en bacteris i arquees. Proporcionen un mecanisme de defensa contra els virus invasors. Els enzims de restricció es classifiquen generalment en cinc tipus diferents: tipus I, tipus II, tipus III, IV i tipus V. EcoRI i HindIII són dos enzims de restricció que pertanyen al grup d'enzims de restricció de tipus II.
Què són els enzims de restricció EcoRI?
EcoRI és un enzim de restricció de tipus II aïllat de les espècies d'E.coli. És un enzim de restricció que escinda les dobles hèlixs d'ADN en fragments en llocs específics. EcoRI també forma part del sistema de restricció-modificació. EcoRI va ser el primer enzim que es va aïllar originalment de la soca RY13 de l'espècie E. coli. S'utilitza com a enzim de restricció en biologia molecular. EcoRI crea 4 extrems enganxosos de nucleòtids amb voladissos extrems de 5' d'AATT. EcoRI talla l'ADN a la seqüència de reconeixement específica G↓AATTC. Té la seqüència complementària palindròmica de CTTAA↓G. A més, aquest enzim de restricció pertany a la subclasse tipus II P (especificitat palindròmica). En la seva estructura primària, EcoRI conté el motiu PD. D/EXK dins del seu lloc actiu, com molts altres enzims de restricció.
Figura 01: EcoRI
L'enzim de restricció EcoRI és un homodímer d'un 31 kDa. Conté un domini globular de l'arquitectura α/β. Cada subunitat conté un bucle que sobresurt del domini globular i s'embolica al voltant de l'ADN quan s'uneix. Aquest enzim es pot cocristal·litzar amb la seqüència que talla normalment. A més, l'enzim de restricció EcoRI s'utilitza en una gran varietat de tècniques de genètica molecular, com ara la clonació, el cribratge d'ADN i les seccions de supressió de condicions in vitro d'ADN.
Què són els enzims de restricció HindIII?
HindIII és un enzim de restricció de tipus II aïllat de l'espècie Haemophilus influenza. Escinda la seqüència palindròmica d'ADN AACCTT en presència del cofactor Mg2+ mitjançant hidròlisi. L'escissió d'aquesta seqüència particular entre l'AA'S (5'A↓ACCTT3' i 3'TTCGA↓A5') dóna lloc a uns voladissos de 5' a la molècula d'ADN anomenats extrems enganxosos. Aquest enzim es troba en organismes procariotes com els bacteris. Els bacteris utilitzen aquest enzim com a mecanisme de defensa contra virus com els bacteriòfags.
Figura 02: HindIII
Estructuralment, HindIII és un homodímer. Conté un nucli estructural comú que consta de quatre làmines β i una sola hèlix α, com altres tipus d'enzims de restricció II. La massa molecular d'aquest enzim és de 34,9 kDa. A més, HindIII és molt útil en experiments moderns de ciència biològica molecular, com ara la seqüenciació i el mapeig d'ADN.
Quines similituds hi ha entre els enzims de restricció EcoRI i HindIII?
- EcoRI i HindIII són dos enzims de restricció que pertanyen al grup d'enzims de restricció de tipus II.
- EcoRI i HindIII es van trobar a principis de la dècada de 1970.
- EcoRI i HindIII contenen tots dos el motiu de la seqüència d'aminoàcids PD.. D/EXK.
- Els dos enzims de restricció realitzen una escissió molt específica de l'ADN.
- Aquests enzims de restricció necessiten Mg2+ com a cofactor per a la seva activitat específica.
- Produeixen extrems enganxosos després de tallar l'ADN.
- Són components molt útils en la investigació biològica molecular moderna.
Quina diferència hi ha entre els enzims de restricció EcoRI i HindIII?
EcoRI és un enzim de restricció de tipus II aïllat de les espècies d'E. coli, mentre que HindIII és un enzim de restricció de tipus II aïllat de les espècies d'Haemophilus influenza. Per tant, aquesta és la diferència clau entre EcoRI i HindIII. A més, EcoRI talla l'ADN a la seqüència de reconeixement específica G↓AATTC, mentre que HindIII talla l'ADN a la seqüència de reconeixement específica A↓ACCTT.
La infografia següent presenta les diferències entre EcoRI i HindIII en forma de taula per comparar-les.
Resum: EcoRI i enzims de restricció HindIII
EcoRI i HindIII són dos enzims de restricció que pertanyen a la subclasse p de tipus II. Realitzen una escissió molt específica de l'ADN. EcoRI és un enzim de restricció de tipus II que s'aïlla de les espècies d'E. coli, mentre que HindIII és un enzim de restricció de tipus II que s'aïlla de les espècies d'Haemophilus influenza. Així doncs, això resumeix la diferència entre EcoRI i HindIII.
