Diferència clau: CFU vs MPN
Unitat formadora de colònies (CFU) i el nombre més probable (MPN) són dos mètodes utilitzats per enumerar microorganismes a les mostres. Ambdós paràmetres s'utilitzen per detectar la qualitat de l'aigua i els bacteris indicadors fecals a les mostres d'aigua. La unitat de formació de colònies és una mesura que s'utilitza per enumerar el nombre de cèl·lules bacterianes o cèl·lules fúngiques viables en un volum o pes específic d'una mostra determinada. La unitat estàndard per a aquest paràmetre és CFU/ml o CFU/g. El nombre més probable és una altra unitat que s'utilitza per mesurar el nombre de cèl·lules bacterianes viables en una mostra líquida. La diferència clau entre CFU i MPN és que CFU es calcula a partir de les colònies bacterianes i fúngiques que creixen en una placa d'agar sòlida mentre que MPN es calcula a partir de bacteris viables que creixen en un medi líquid.
Què és CFU?
Unitat formadora de colònies (CFU) és un paràmetre que mesura el nombre de cèl·lules bacterianes o fúngiques viables en una mostra determinada. El mètode que compta les unitats formadores de colònies s'anomena recompte estàndard de plaques. Les colònies viables que apareixen a les plaques d'agar s'expressen com a CFU per 1 ml (unitat formadora de colònies per mil·lilitre) de la mostra per a líquids o CFU per 1 g (unitat formadora de colònies per gram) de la mostra per a sòlids.
Hi ha dos mètodes habituals que s'utilitzen per mesurar CFU en una mostra. Són el mètode de la placa estesa i el mètode de la placa abocament. Aquests dos mètodes estan recolzats per una tècnica anomenada dilució en sèrie. Les mostres diluïdes en sèrie permeten obtenir un nombre comptable de colònies a la superfície de l'agar. Un volum conegut de mostra es pot estendre a la superfície d'una placa d'agar, o barrejar-se amb agar i abocar-se sobre una placa. A continuació, s'incuba la placa i es comptabilitzen les colònies sorgides. El nombre de colònies es relaciona amb el nombre de microorganismes dins de la mostra original. Les plaques que mostren massa colònies o massa poques colònies s'exclouen del recompte perquè els resultats poden no ser estadísticament precisos en aquestes plaques. Estadísticament, el millor rang és de 30 a 300 colònies en una placa d'agar. Per tant, s'han de seleccionar les plaques correctes per a una enumeració precisa. La dilució en sèrie es realitza per a la funció anterior.
Un cop compteu el nombre de colònies viables a les plaques, es pot calcular CFU/ml mitjançant l'equació següent.
CFU per ml de mostra original=nombre de colònies en una placa X factor de dilució
Factor de dilució=(1/ Dilució de la placa)
Per exemple, si obteniu 149 colònies a la placa de la dilució 10-4, el nombre de bacteris en 1 ml de la mostra original es pot calcular de la següent manera:
CFU/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 o 1490000
=1. 49 x 106
Figura 01: Unitat de formació de colònies
Què és MPN?
El nombre més probable és una mesura alternativa a CFU/ml. MPN també estima les cèl·lules viables en una mostra líquida. Compta els organismes que creixen en un cultiu líquid i és una tècnica predominantment bacteriològica. Aquest mètode és especialment útil per a mostres que contenen concentracions baixes de cèl·lules bacterianes; per exemple, llet, aigua potable, etc. El valor MPN s'expressa per a 100 ml de volum. MPN es basa en un mètode estadístic basat en la teoria de la probabilitat. Hi ha taules estadístiques dissenyades per trobar valors de MPN per 100 ml de mostra. Aquestes taules mostren els resultats amb límits de confiança del 95%.
El valor MPN es calcula després de realitzar una tècnica anomenada mètode de fermentació de tubs múltiples. S'inoculen tres conjunts de tubs que contenen un medi de cultiu adequat amb tres volums diferents de la mostra, com ara 10 ml, 1 ml i 0.1 ml i s'incuba per al creixement. Després del període d'incubació, els tubs es puntuen + (positiu) o - (negatiu) per la presència o absència de creixement. A continuació, es compara el patró de resultats positius i negatius amb una taula MPN de probabilitats estadístiques per estimar el nombre de microorganismes. A continuació, es dóna el valor MPN per a 100 ml de la mostra. MPN s'utilitza àmpliament per detectar bacteris coliformes presents a mostres d'aigua.
Figura 02: taula MPN
Quina diferència hi ha entre CFU i MPN?
CFU vs MPN |
|
| CFU és una mesura que s'utilitza per expressar el nombre de colònies de bacteris o fongs viables en una mostra determinada. | MPN és una mesura alternativa a la CFU i mesura el nombre de cèl·lules bacterianes viables en una mostra líquida. |
| Unitat | |
| CFU/ml o CFU/g | MPN/100 ml |
| Càlcul | |
| CFU es calcula comptant el nombre de colònies cultivades en plaques d'agar. | MPN es calcula comparant patrons positius i negatius dels tubs amb la taula estadística de MPN. |
| Tècnica de dilució en sèrie | |
| La dilució en sèrie es realitza abans de col·locar les mostres en plaques d'agar. | La dilució en sèrie no es realitza normalment quan es calcula el MPN |
| Mètodes | |
| El mètode de la placa d'extensió i el mètode de la placa d'abocament són dos tipus de mètodes que es realitzen per obtenir CFU. | La fermentació en tubs múltiples és el mètode que es realitza per obtenir el valor MPN. |
Resum: CFU vs MPN
Mesurar el creixement microbià és necessari per moltes raons. A les plantes de processament d'aliments, és necessari mesurar el nivell i el tipus de microorganismes dels aliments. En la indústria alimentària i la medicina, cal garantir que els tractaments d'esterilització s'apliquen de manera eficaç. A les plantes de tractament d'aigües residuals, s'ha de fer un recompte microbià rutinària. Quan s'optimitza el procediment en biologia molecular, cal mesurar el nombre de colònies a les plaques. Per tant, hi ha diferents mètodes d'enumeració i mesura de creixement disponibles. CFU i MPN són dos mètodes que s'adopten àmpliament en diversos camps. CFU és una mesura del nombre de colònies de bacteris i fongs viables presents en una mostra determinada. Es calcula mitjançant el mètode de recompte de plaques estàndard o el mètode de recompte de plaques viable. MPN és una altra mesura que expressa el nombre de cèl·lules bacterianes presents en un volum determinat de la mostra líquida. Es calcula mitjançant el mètode de fermentació de múltiples tubs i la taula MPN. Aquesta és la diferència entre CFU i MPN.
Baixa la versió PDF de CFU vs MPN
Podeu baixar la versió PDF d'aquest article i utilitzar-la per a finalitats fora de línia segons les notes de citació. Baixeu la versió PDF aquí Diferència entre CFU i MPN.
