Diferència clau: hibridació in situ vs immunohistoquímica
El diagnòstic de càncer i mal alties infeccioses és una tendència popular on s'utilitzen noves tècniques basades en proteòmica i genòmica amb la finalitat d'identificar tumors o cèl·lules infeccioses, la seva proliferació i els llocs de desenvolupament cel·lular i analitzar la base genètica de la majoria de les cèl·lules transmissibles i transmissibles. mal alties no transmissibles. Això donarà lloc a un processament i disseny de fàrmacs precisos i al desenvolupament de teràpies personalitzades per a mal alties. La hibridació in situ (ISH) i la immunohistoquímica (IHC) són dues tècniques àmpliament utilitzades en biologia del càncer i la diferència clau entre la hibridació in situ i la immunoquímica rau en les molècules que s'utilitzen en el procediment d'anàlisi. A l'ISH, les sondes d'àcid nucleic s'utilitzen en l'anàlisi, mentre que a l'IHC s'utilitzen anticossos monoclonals i policlonals per a les determinacions diagnòstiques.
Què és la hibridació in situ (ISH)?
La hibridació in situ és una tècnica d'hibridació d'àcids nucleics que es realitza directament sobre una porció o secció de teixit, en tot el teixit o en cèl·lules. La tècnica depèn de la teoria de l'aparellament de bases complementàries de Watson Crick, donant lloc a híbrids ADN-ADN o híbrids ADN-ARN que poden detectar gens mutats o identificar el gen d'interès necessari. Les seqüències d'ADN de cadena simple, les seqüències d'ADN de doble cadena, les seqüències d'ARN de cadena simple o les seqüències d'oligonucleòtids sintètics s'utilitzen com a sondes durant la tècnica d'hibridació, i aquestes sondes s'etiqueten amb un fòsfor radioactiu a l'extrem 5' per als procediments d'identificació després d'autorradiografia o es marquen amb colorants fluorescents.. Hi ha diferents tipus de tècniques ISH disponibles en funció del tipus de sonda utilitzada i del tipus de tècnica de visualització seguida.
Figura 01: hibridació fluorescent in situ
Hi ha moltes aplicacions de l'ISH, principalment en el diagnòstic molecular de mal alties infeccioses per tal d'identificar la presència de patògens i confirmar el patogen mitjançant el diagnòstic molecular. També s'utilitza en els camps de la biologia del desenvolupament, el cariotip i l'anàlisi filogenètica i el cartografia físic de cromosomes.
Què és la immunohistoquímica (IHC)?
En la tècnica de l'IHC, la principal molècula analitzada és l'antigen. Durant l'IHC, s'utilitzen anticossos monoclonals i policlonals per determinar la presència d'antígens en cas d'infecció o estat de proliferació cel·lular maligna. La tècnica es basa en la unió antigen-anticossos, i per a aquesta tècnica s'utilitzen etiquetes enzimàtiques; una d'aquestes aplicacions és l'ELISA (enzyme linked immunosorbent assay). Els marcadors també poden ser anticossos amb etiqueta fluorescent o anticossos radiomarcats.
Figura 02: Immunohistoquímica
IHC s'utilitza àmpliament per a la detecció de cèl·lules canceroses. Els procediments de diagnòstic es dirigeixen als antígens presents a les cèl·lules tumorals per identificar i caracteritzar el tumor. S'incorpora el mateix procediment per diagnosticar agents infecciosos. Els anticossos monoclonals i policlonals també s'utilitzen per analitzar diferents productes gènics permetent la reacció d'unió anticossos-antigen entre la proteïna desitjada i l'anticossos sintètics administrats.
Quines similituds hi ha entre la hibridació in situ i la immunohistoquímica?
- ISH i IHC són reaccions molt específiques.
- Les dues tècniques són molt precises.
- Ambdues tècniques es poden utilitzar en el diagnòstic de càncer i mal alties infeccioses.
- Aquestes tècniques es realitzen en entorns estèrils in vitro.
- Totes dues són tècniques ràpides que proporcionen resultats reproduïbles.
- ISH i IHC utilitzen mètodes de detecció com ara l'etiquetatge per ràdio i tècniques de fluorescència.
Quina diferència hi ha entre la hibridació in situ i la immunohistoquímica?
Hibridació in situ vs immunohistoquímica |
|
| ISH és una tècnica d'hibridació d'àcids nucleics que es realitza directament sobre una porció o secció de teixit o sobre tot el teixit. | IHC és una tècnica on s'utilitzen anticossos monoclonals i policlonals per determinar la presència d'antígens, que són marcadors especials de proteïnes col·locats a la superfície cel·lular. |
| Tipus de biomolècules analitzades | |
| ISH analitza els àcids nucleics. | IHC analitza proteïnes-antígens. |
| Bases de la reacció bioquímica | |
| En aquesta tècnica es produeix un aparellament de bases complementàries entre ADN-ADN o ADN-ARN. | Les interaccions antigen-anticossos estan implicades en la immunohistoquímica. |
| Mètodes de detecció vinculats a enzims | |
| Els mètodes de detecció vinculats a enzims no es poden utilitzar a ISH. | Els mètodes de detecció vinculats a enzims es poden utilitzar a IHC. |
Resum: hibridació in situ vs immunohistoquímica
Els diagnòstics moleculars són mètodes ràpids i de confirmació que es poden utilitzar per identificar una mal altia no transmissible com el càncer o una mal altia transmissible com el VIH o la tuberculosi a partir dels marcadors moleculars presents a les cèl·lules que condueixen a la manifestació de la mal altia.. Els marcadors moleculars poden estar presents en forma de proteïnes expressades o a nivell genètic a partir de les quals s'introdueixen diferents tècniques noves per augmentar l'eficiència i són menys laborioses, tot i que aquestes tècniques tenen un cost elevat. Així, l'ISH depèn de la formació d'híbrids ADN-ADN o ADN-ARN, i l'IHC depèn de les reaccions específiques entre l'anticossos i l'antigen. Aquesta és la diferència entre la hibridació in situ.
Baixa la versió PDF de la hibridació in situ vs la immunohistoquímica
Podeu baixar la versió PDF d'aquest article i utilitzar-la per a finalitats fora de línia segons la nota de citació. Si us plau, descarregueu la versió PDF aquí Diferència entre la hibridació in situ i la immunohistoquímica.
