Diferència clau: immunocitoquímica vs immunohistoquímica
La immunocitoquímica (ICC) i la immunohistoquímica (IHC) són dues tècniques àmpliament utilitzades en el diagnòstic molecular, que identifica i confirma l'aparició tant de mal alties no transmissibles com de mal alties transmissibles a partir dels marcadors moleculars presents a les cèl·lules. La diferència clau entre la immunocitoquímica i la immunohistoquímica és la molècula que s'utilitza com a procediment d'anàlisi en aquestes tècniques. A l'ICC s'utilitzen anticossos primaris i secundaris conjugats amb marcadors com la fluorescència, mentre que per a les determinacions diagnòstiques s'utilitzen anticossos IHC, monoclonals i policlonals.
Què és la immunocitoquímica (ICC)?
ICC utilitza anticossos primaris i secundaris units a marcadors com ara marcadors fluorescents o enzims i és un mètode de detecció potent per detectar antígens presents a les cèl·lules diana que poden ser partícules cel·lulars infeccioses o cèl·lules tumorals canceroses. Es requereixen tres tipus de controls per a la immunocitoquímica.
- Anticossos primaris: control que mostra l'especificitat de l'anticòs primari que s'uneix a l'antigen
- Anticossos secundaris: control que mostra que l'etiqueta és específica de l'anticossos primari
- Controls de l'etiqueta: mostreu que l'etiquetatge és el resultat de l'etiqueta afegida i no el resultat d'un etiquetatge endògen.
Figura 01: la immunocitoquímica etiqueta proteïnes individuals dins de les cèl·lules (aquí, la tirosina hidroxilasa als axons de les neurones autònomes simpàtiques es mostra en verd).
El control d'anticossos primari és específic per a cada anticòs nou i no es pot repetir per a cada experiment. El control d'anticossos secundaris es dissenya en funció de l'anticòs primari utilitzat en l'experiment i s'inclou amb cada experiment. El control d'etiquetatge s'inclou si es canvia una condició del procediment, es canvia la mostra o quan es troba un etiquetatge inesperat.
Les dues aplicacions principals de l'ICC són Radio Immuno - Assay (RIA) i Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). L'anticòs més utilitzat és la immunoglobulina G.
Què és la immunohistoquímica (IHC)?
En immunohistoquímica, la mostra font conté anticossos monoclonals i policlonals per tal de determinar la presència d'antígens en cèl·lules estranyes. Aquesta tècnica es basa en la reacció específica de la unió antigen-anticossos. Els anticossos utilitzats en la detecció es poden etiquetar amb diferents marcadors; poden ser marcadors de fluorescència, marcadors radiomarcats o marcadors químics. Mitjançant la facilitació de la unió in vitro entre l'antigen i l'anticossos objectiu, es pot determinar la presència o l'absència d'una proteïna determinada d'una cèl·lula.
Figura 02: Tinció immunohistoquímica del ronyó normal amb CD10
Actualment, els científics participen en el desenvolupament d'anticossos objectiu per a antígens específics presents a les cèl·lules que poden desenvolupar-se com a cèl·lules tumorals malignes o antígens presents en agents infecciosos com el VIH.
Quines similituds hi ha entre la immunocitoquímica i la immunohistoquímica?
- Les reaccions són molt específiques i precises en ICC i IHC.
- Les aplicacions de l'ICC i l'IHC inclouen el diagnòstic de càncer i mal alties infeccioses.
- Les condicions estèrils s'han de mantenir en ambdues condicions i s'han de realitzar in vitro
- Les dues tècniques proporcionen resultats reproduïbles.
- Tots dos són ràpids.
- Etiquetatge per ràdio i tècniques de fluorescència s'utilitzen com a mètodes de detecció tant a ICC com a IHC.
- Tots dos es basen en l'aparellament antigen-anticossos.
Quina diferència hi ha entre la immunocitoquímica i la immunohistoquímica?
Immunocitoquímica (ICC) vs Immunohistoquímica (IHC) |
|
ICC utilitza marcadors lligats a anticossos primaris i secundaris, com ara marcadors fluorescents o enzims, i és un mètode de detecció potent per detectar antígens presents a les cèl·lules diana. | IHC és un mètode que utilitza anticossos monoclonals i policlonals per determinar la presència d'antígens que són marcadors especials de proteïnes col·locats a la superfície cel·lular. |
Font de mostra | |
Les mostres derivades de teixits que han estat processats histològicament en seccions primes s'utilitzen a l'ICC. | IHC utilitza mostres formades per cèl·lules cultivades en monocapa o cèl·lules en suspensió que es dipositen en un portaobjectes. |
Procés de mostra | |
A l'ICC, les cèl·lules han de ser permeables per facilitar la penetració d'anticossos a les dianes intracel·lulars. | A l'IHC, les cèl·lules es fixen en formalina, s'incrusten en parafina abans de la tinció. |
Resum: immunocitoquímica vs immunohistoquímica
El diagnòstic molecular s'utilitza per identificar i confirmar l'aparició tant de mal alties no transmissibles com de mal alties transmissibles a partir dels marcadors moleculars presents a les cèl·lules. Els marcadors moleculars poden ser proteïnes o seqüències d'ADN o ARN; El desenvolupament de tecnologies com l'ICC i l'IHC han obert el camí perquè els científics identifiquin la mal altia i la seva causa en una fase inicial. Tant l'ICC com l'IHC depenen de les reaccions específiques entre l'anticossos i l'antigen encara que sigui la font de la mostra. La principal diferència entre la immunocitoquímica i la immunohistoquímica és el processament de la mostra dels dos procediments.
Baixa la versió PDF d'Immunocitoquímica vs Immunohistoquímica
Podeu baixar la versió PDF d'aquest article i utilitzar-la per a finalitats fora de línia segons la nota de citació. Si us plau, descarregueu la versió PDF aquí Diferència entre la immunocitoquímica i la immunohistoquímica.