Diferència clau: HPLC vs LCMS
Vegem primer el significat de HPLC i LCMS abans d'analitzar la diferència entre HPLC i LCMS. La cromatografia és una tècnica de separació en anàlisi química on els components de la mostra es separen durant el pas per un medi cromatogràfic. També implica la interacció amb la mostra, la fase estacionària i la fase mòbil. HPLC significa cromatografia líquida d' alt rendiment i s'utilitza com a mètode de cromatografia líquida en química analítica. La combinació de cromatografia líquida i espectroscòpia de masses (LCMS) s'ha desenvolupat per a l'anàlisi quantitativa de biomolècules seleccionades i és un procediment d'assaig molt sensible, precís i específic en comparació amb HPLC. Aquesta és la diferència clau entre HPLC i LCMC. Aquest article us presentarà l'HPLC i la LCMC que tracten l'anàlisi química i parlarem de les diferències entre HPLC i LCMS.
Què és l'HPLC?
La cromatografia líquida d' alt rendiment (HPLC) és una tècnica de separació popular en química analítica. S'utilitza principalment per separar els components, identificar i quantificar cada component d'una mescla. Anteriorment, aquest mètode es coneixia com a cromatografia líquida d' alta pressió perquè depenia de les bombes per fer fluir un dissolvent líquid a pressió que comprenia la barreja de mostra a través d'una columna empaquetada amb un material adsorbent sòlid. Tots i cadascun dels components de la barreja de mostra interaccionen de manera diferent amb el material adsorbent sòlid, el que resulta en diferents cabals per a diferents constituents. Això pot provocar la separació dels constituents a mesura que surten de la columna HPLC.
HPLC s'ha utilitzat per a diverses aplicacions, com ara l'anàlisi dels nivells de vitamina D a la sang, l'ús il·legal de drogues dels atletes mitjançant la detecció de residus de drogues a l'orina, la classificació dels components d'una mostra biològica complexa amb finalitats d'investigació i anàlisi. i fabricació de productes farmacèutics.
Què és LCMS?
La cromatografia líquida–espectrometria de masses (LCMS) és una tècnica analítica que combina les capacitats de separació física de la cromatografia líquida amb les capacitats d'anàlisi de masses de l'espectrometria de masses (MS). La cromatografia líquida és una tècnica de separació i s'utilitza l'espectrometria de masses per analitzar la relació massa-càrrega de les partícules carregades. La separació física s'aconsegueix normalment per HPLC i alternativament, LCMS també conegut com HPLC-MS. La LCMS és una tècnica analítica dominant que té una precisió, sensibilitat i especificitat molt elevades en comparació amb l'HPLC. Per tant, és útil en moltes aplicacions com ara finalitats d'investigació, anàlisi de fàrmacs, anàlisi d'aliments, etc. LCMS s'utilitza principalment per separar, detectar, identificar i quantificar propietats bioquímiques d'una mostra concreta en presència de mescles químiques complexes.
Quina diferència hi ha entre HPLC i LCMC?
Acrònim i definició de HPLC i LCMC
HPLC: HPLC significa cromatografia líquida d' alt rendiment. És una tècnica de separació que s'utilitza principalment per separar els components, identificar i quantificar cada component d'una mescla.
LCMS: LCMS significa cromatografia líquida i espectrometria de masses. És una tècnica analítica que combina les capacitats de separació física de la cromatografia líquida amb les capacitats d'anàlisi de masses de l'espectrometria de masses (MS).
Característiques de HPLC i LCMC
Classificació
HPLC: només és un mètode de cromatografia líquida.
LCMS: aquesta és una combinació del mètode de cromatografia líquida i el mètode d'espectrometria de masses.
Eficiència
HPLC: en comparació amb LCMS, l'anàlisi HPLC és menys eficient i més lenta.
LCMS: en comparació amb HPLC, l'anàlisi LCMS és eficient i més ràpida.
Sensibilitat
HPLC: en comparació amb LCMS, l'anàlisi HPLC és menys sensible.
LCMS: en comparació amb HPLC, l'anàlisi LCMS és més sensible.
Especificitat
HPLC: en comparació amb LCMS, l'anàlisi HPLC és menys específica.
LCMS: en comparació amb HPLC, l'anàlisi LCMS és més específica.
Precisió
HPLC: HPLC dóna resultats menys precisos que LCMS per a la determinació d'alguns productes químics.
LCMS: LCMS dóna resultats més precisos que l'HPLC per a la determinació d'alguns productes químics.
Component
HPLC: l'HPLC es pot considerar un component de LCMS.
LCMS: LCMS no es pot considerar com un component de l'HPLC.
Font d'ions
HPLC: la font d'ions no existeix a l'instrument HPLC.
LCMS: la font d'ions està present a l'instrument LCMS.
Aplicacions
HPLC: es poden analitzar ions, polímers, molècules orgàniques i biomolècules mitjançant HPLC.
LCMS: es poden analitzar molècules i biomolècules orgàniques. A diferència de l'HPLC, el LCMS es pot utilitzar per examinar mescles incompletament resoltes.
Operació
HPLC: el diagrama d'un instrument d'HPLC es mostra a la figura 1, i normalment inclou un mostreig automàtic, bombes i un detector. El mostreig introdueix la mescla de la mostra a la fase mòbil (mescla de dissolvents a pressió com aigua, acetonitril i/o metanol) que la transfereix a la columna. Les bombes proporcionen el cabal desitjat i la composició de la fase mòbil a través de la columna. La columna s'omple amb l'adsorbent, que és una partícula sòlida granulosa com ara sílice o polímers. El detector produeix un senyal proporcional a la quantitat de presència de components de la mostra a la columna, per tant permet una anàlisi quantificable dels components de la mostra seleccionats. L'instrument HPLC està controlat i l'anàlisi de dades la proporciona un microprocessador digital i un programari d'usuari.
Figura 1: Diagrama de l'instrument HPLC
LCMS: El diagrama de l'instrument LCMS es mostra a la figura 2. L'extracte de la mostra s'insereix a la columna formada per HPLC. Aquesta columna conserva els metabòlits de la mostra en funció de caràcters físics i diferents metabòlits flueixen a l'espectròmetre de masses a diferents intervals de temps. L'espectroscòpia de masses s'utilitza per avaluar masses de partícules, per determinar la disposició elemental d'una molècula i per aclarir les estructures de les molècules. Tanmateix, la mostra s'hauria d'ionitzar per generar molècules carregades per tal de determinar les seves relacions massa-càrrega. Per tant, en lloc dels instruments HPLC, el LCMS consta de tres mòduls addicionals, com ara una font de ferro, un analitzador de masses i un detector. Una font d'ions pot transformar una mostra de fase gasosa en ions i un analitzador de masses agrupant els ions per les seves masses mitjançant camps electromagnètics. Finalment, un detector quantifica els valors i lliura les dades de cada ió present a la mostra. La tècnica LCMS es pot utilitzar tant per a aplicacions qualitatives com quantitatives.
Figura 2: Diagrama de l'instrument LCMS
En conclusió, HPLC és un mètode de cromatografia líquida mentre que LCMS és una combinació de cromatografia líquida i espectrometria de masses. Aquestes dues tècniques d'anàlisi tenen característiques diferents, però es poden utilitzar per identificar i quantificar composicions d'aliments, productes farmacèutics i altres molècules bioactives.
